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褪黑素是由松果体合成的一种重要神经内分泌激素,具有多种 生理调节作用,能够影响情绪、睡眠、性行为、生殖周期、免疫 功能和昼夜节律。褪黑素能够清除自由基,对中枢神经系统具有 保护作用,在延缓衰老方面也有重要作用。 褪黑素的作用是通过高亲和力的膜受体介导的,属G蛋白偶联 受体超家族。己知两种褪黑素受体 MT1 和 MT2,一种对百日咳毒 素敏感,另外一种对霍乱毒素敏感。褪黑素受体能调节多种第二 信使物质如 cAMP,cGMP,二酰基甘油,三磷酸肌醇,花生四烯酸。 本研究运用免疫组化和原位杂交方法,旨在阐明以下几个问 题;1.在脑组织内褪黑素受体是否存在?2 脑组织内褪黑素存在 的部位。其最终目的是为研究褪黑素调节脑组织功能的机制提供 实验依据。 本篇文章的主要研究方法和结果:使用免疫组织化学方法和 原位杂交方法检测褪黑素受体在人早期胚胎脑组织中的分布:1 将 脑组织切片,以辣根过氧化物酶进行免疫酶法组化染色:结果发 现,经过MT1 受体抗体处理的切片,小脑皮质和下丘脑细胞膜、 细胞浆均有棕褐色阳性染色;经过MT2受体抗体处理的切片,下丘 脑、枕叶和延髓中细胞膜、细胞浆有棕褐色阳性染色,提示两种 褪黑素受体存在于脑组织细胞膜、细胞质内。2.将脑组织切片用 过氧化氢甲醇处理后,分别用 MT1、MT2 探针,进行原位杂交及 染色;结果显示,用 MT1探针,下丘脑组织细胞浆内呈阳性染色, 用 MT2 探针,在下丘脑和延髓中呈阳性染色,说明褪黑素 MT1、 MT2受体在脑细胞有表达。 结论:人胚胎脑组织细胞存在 MT1、MT2 两种褪黑素受体, 位干细胞膜、细胞浆内,证明脑组织是褪黑素作用的靶器官,褪 黑素可能直接作用于脑组织,调节胚胎脑组织的功能及发育。