免疫PCR检测抗p53蛋白抗体在乳腺癌诊断中的应用

来源 :中国人民解放军军事医学科学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:flyingmomo1986
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本研究建立了血清抗P53蛋白抗体免疫聚合酶链反应(Immuno-polymerase chain reaction,免疫PCR)检测方法,探讨了乳腺癌患者血清中抗P53蛋白抗体与组织中P53蛋白表达之间的关系及临床意义,旨在为临床乳腺癌P53蛋白检测提供实用的替代工具。 我们以聚乙烯亚胺(PEI)为化学交联剂,使SaHIgG和PNC3DNA发生化学连接,构建了SaHIgG-DNA探针,经DNA和抗IgG活性鉴定,质量合格。本实验构建的SaHIgG-DNA探针中SaHIgG属于二抗,因此在免疫PCR技术中具有广泛应用价值。 用免疫PCR方法检测86份乳腺癌患者血清抗P53蛋白抗体的阳性率为39.5%,40份非癌患者和120份正常人血清抗P53蛋白抗体均为阴性,乳腺癌患者血清抗P53蛋白抗体检出率明显高于非癌患者和正常人(P<0.05),非癌患者与正常人之间无显著性差异(P>0.05),因此,免疫PCR方法检测血清抗P53蛋白抗体特异性为100%,可以作为乳腺癌血清学诊断指标。 采用免疫组化(Immunohistochemistry,IHC)方法测定组织中的P53蛋白表达状况,53份P53蛋白阳性患者血清抗P53蛋白抗体阳性率为64.2%,显著高于P53蛋白阴性对照组(0%),血清抗P53蛋白抗体测定与P53蛋白表达密切相关(P<0.01)。 ELISA方法检测血清抗P53蛋白抗体的阳性率为18.6%,免疫PCR方法对抗P53蛋白抗体的检出率(39.5%)明显高于ELISA方法(P<0.01),因此免疫PCR方法检测乳腺癌患者血清抗P53蛋白抗体的敏感性明显高于ELISA方法。 免疫PCR方法检测血清抗p53蛋白抗体与传统的免疫组化染色法相比较,取材更方便,创伤性小且检测方法简便易行,因此检测血清抗P53蛋白抗体是检测组织P53蛋白理想的替代工具。
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