【摘 要】
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目的:构建NT4与活性依赖性神经营养因子-9(ADNF-9)融合基因NT4-ADNF-9,并进行序列分析;利用基因重组技术将融合基因NT4-ADNF-9亚克隆到原核表达载体pBV220,构建重组表达质粒p
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目的:构建NT4与活性依赖性神经营养因子-9(ADNF-9)融合基因NT4-ADNF-9,并进行序列分析;利用基因重组技术将融合基因NT4-ADNF-9亚克隆到原核表达载体pBV220,构建重组表达质粒pBV220/NT4-ADNF-9,诱导表达融合基因,并检测其生物活性;构建基因治疗通用型腺伴病毒(AAV)载体,并检测它转导外源基因的作用;包装重组病毒rAAV-ADNF-9,观察该重组病毒经嗅神经通路对闭合性脑损伤的神经保护作用.结论:1、成功构建了NT4-ADNF-9融合基因,为研究在原核及真核细胞中的表达,进一步开展将ADNF-9用于基因治疗创造了有利条件.2、重组质粒可分泌表达ADNF-9蛋白,而且ADNF-9蛋白有良好的生物活性.为进一步开展ADNF-9基因治疗CNS疾病提供了可能.3、构建的重组AAV通用载体pSSHG-CMV,可转导外源基因,用于基因治疗的研究.4、重组病毒可感染鼻粘膜细胞,分泌表达的ADNF-9蛋白可对小鼠闭合性脑损伤起神经保护作用.
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