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天南星为天南星科植物天南星Arisaemaerubescens（Wall.）Schott、异叶天南星Arisaema heterophyllum B1.或东北天南星Arisaema amurense Maxim的干燥块茎,性温,味苦、辛;有毒,具有燥湿化痰,祛风止痉,散结消肿的作用。白附子为天南星科植物独角莲Typhonium giganteum Engl.的干燥块茎,性温,味辛;有毒,具有祛风痰,定惊搐,解毒散结,止痛的作用。天南星和白附子生品均有毒,表现为强烈的刺激性毒性,经炮制降低其毒性,方可应用于临床。在《中国药典》2020版中两者均采用姜矾制的炮制工艺,但炮制工艺繁琐,耗时较长,成本较高,因此,市场上不乏生制品混掺的现象,这为天南星和白附子的临床用药安全带来了巨大的隐患。《中国药典》2020版中天南星和白附子的质量标准均缺少毒性控制指标。课题组前期研究发现,天南科有毒中药天南星和白附子具有共性的毒性物质基础—草酸钙针晶与凝集素蛋白共同构成的针晶复合物。因此,基于目前天南星和白附子缺乏毒性控制指标的现状,结合课题组前期的研究成果,本文建立了天南星和白附子内源性毒性物质草酸钙针晶及凝集素蛋白含量测定方法,并建立相应的限度标准。并基于近红外光谱技术结合化学计量学模式识别的分析方法,分别对天南星和白附子建立了炮制前后样品以及生制混掺样品的鉴别模型,对所建立的鉴别模型进行了初步的验证,结果表明该模型表现出良好的鉴别性能和准确性,为天南星和白附子生制品识别提供了方法。此外,本文还基于UPLC-TOF-MS技术分别对天南星和白附子炮制前后的成分变化进行分析,从成分变化的角度阐明了天南星和白附子炮制前后的差异,并确立了炮制前后的差异性成分,为进一步研究两者炮制解毒增效的物质基础提供科学数据和研究依据。具体研究内容如下:1.天南星和白附子炮制前后内源性毒性成分含量变化研究对天南星和白附子炮制前后的内源性毒性成分含量进行测定:采用HPLC法分别对33批天南星和35批白附子炮制前后草酸钙针晶含量进行测定;采用Western-Blot法分别对32批天南星和24批白附子炮制前后凝集素蛋白进行检测。结果显示各批次生天南星草酸钙针晶含量为0.63%～2.33%,平均含量为1.39%;各批次制天南星草酸钙针晶含量为0.20%～0.95%,平均含量0.50%;草酸钙含量的降幅为51.0%～78.3%,平均降幅为64.14%。各批次生白附子草酸钙针晶含量为0.49%～1.76%,平均含量为0.91%;各批次制白附子草酸钙针晶含量为0.00%～0.46%,平均含量0.26%;草酸钙含量的降幅为51.1%～100%,平均降幅为70.60%。对凝集素含量分析结果显示,各批次天南星和白附子炮制后Western-Blot法均未检测到活性凝集素蛋白。基于多批次样品测定的结果,建议制天南星不得检出凝集素蛋白,且制天南星草酸钙含量降幅应不低于50.0%;建议制白附子不得检出凝集素蛋白,且制白附子草酸钙含量降幅应不低于50.0%。上述研究表明天南星和白附子经过复制法炮制,所含内源性毒性物质草酸钙针晶及蛋白的含量均显著降低。2.基于近红外光谱的天南星和白附子生制品快速识别研究应用近红外光谱（NIRS）技术分别对天南星和白附子炮制前后的样品及不同比例生制品混掺样品进行分析,在12000～4000 cm-1波数范围内采集光谱,结合化学计量学模式识别的分析方法建立判别模型。所建立的天南星炮制前后判别分析（Discriminant Analysis）模型和距离匹配（Distance Match）模型显示生天南星和天南星炮制不及品均与制天南星有显著差异,可以实现快速识别;所建立的天南星生制品混掺样品判别分析（Discriminant Analysis）模型和距离匹配（Distance Match）模型显示一系列不同比例的天南星生制品混掺样品均与制天南星有显著差异,可以实现快速识别;所建立的白附子炮制前后判别分析（Discriminant Analysis）模型和距离匹配（Distance Match）模型显示生白附子和白附子炮制不及品均与制白附子有显著差异,可以实现快速识别;所建立的白附子生制混掺品判别分析（Discriminant Analysis）模型和距离匹配（Distance Match）模型显示一系列不同比例的白附子生制品混掺样品均与制白附子有显著差异,可以实现快速识别。3.基于UPLC-TOF-MS天南星和白附子炮制前后成分对比研究为探究天南星、白附子炮制前后成分差异,采用UPLC-TOF-MS法分别对15批天南星和15批白附子炮制前后成分进行分析,并用Marker View软件对特征峰进行提取,导入SIMCA软件分析炮制前后差异性成分,根据自建天南星、白附子化学成分数据库对差异性成分进行解析。结果显示天南星、白附子炮制前后成分有显著差异,其中天南星炮制前后有121个成分发生显著变化,其中66个成分炮制后含量降低,10个成分炮制后含量升高,24个成分炮制后消失,21个成分为炮制后新增。鉴定了其中的85个化合物,包括氨基酸10个、生物碱18个、肽类18个、有机酸及酯类6个、黄酮1个、其它类11个、挥发油4个、姜辣素类17个;推测了其余36个化合物的分子式;白附子炮制前后有80个成分发生显著变化,其中26个成分炮制后含量降低,27个成分炮制后含量升高,15个成分炮制后消失,12个成分为炮制后新增。鉴定了其中的54个化合物,其中氨基酸4个、生物碱11个、肽类9个、有机酸及酯类4个、黄酮1个、其它类14个、姜辣素类8个、挥发油类3个;推测了其它26个化合物的分子式。本论文分别以HPLC法及Western-blot法测定天南星、白附子中内源性毒性物质草酸钙针晶及凝集素蛋白的含量,并通过多批次样品的分析制定了毒性成分的限度及要求。建立了近红外光谱（NIRS）快速识别天南星和白附子炮制前后的样品及不同比例生制品混掺样品的方法,并通过UPLC-TOF-MS分析了天南星和白附子天南星和白附子炮制前后的差异成分。建立的方法合理可行,为天南星和白附子炮制前后的饮片识别提供依据。