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向日葵黄萎病是向日葵三大严重病害之一,普遍发生于向日葵主产区,引起巨大的损失。大丽轮枝菌是向日葵黄萎病的主要病原菌。据报道轮枝菌属中变黑轮枝菌,云状轮枝菌,三体轮枝菌和黑白轮枝菌也可导致黄萎病的发生。变黑轮枝菌诱发向日葵黄萎病未有报道。本实验选取具有典型黄萎病症状的向日葵病株,从病部分离、纯化获得致病菌,通过显微镜观察形态结构及运用分子生物学鉴定对病原菌进行分类鉴定。根据柯赫氏法则,进行回接验证。另外为了深入了解向目葵黄萎病的发病规律,对所分离到的变黑轮枝菌的形态学特征和生物学特性进行了初步研究。1.PDA培养基上菌落形态：初期菌落呈现白色,不发达的气生菌丝,椭圆或短圆柱形的分生孢子,透明,单孢,分生孢子梗多为二次分枝,菌丝为白色的无隔菌丝,后期产生黑色的厚垣孢子。通过ITS序列分析,病部分离病原菌为变黑轮枝菌。2.变黑轮枝菌最适宜的生长温度为24～26℃时,当温度超过30℃时,菌落生长速率逐渐降低。温度升高至30℃时产孢量达到最高峰。将供试菌株在50℃时处理10min,仍有菌丝可以生长,但当温度为55℃时处理10min,无菌丝生长,可以确定该菌株的致死温度为55℃。3.变黑轮枝菌可以在pH为4-13下生长,尤其以pH为6时生长最旺盛,当pH为4,12,13时均能够生长,说明该菌具有极强的耐酸碱性。在产孢量实验中,pH为7时产孢量最大。4.变黑轮枝菌选择PSA培养基时,菌落生长最适宜,选择PDA培养基时,产孢量最大。以Czapek培养基为基础培养基,以淀粉为碳源时,以硝酸钠为氮源时生长最旺盛。以淀粉为碳源,尿素为氮源时产孢量达到最大。5.注射接种法、蘸根接种法、灌根接种法和土壤拌种法处理植株时,只有注射接种法和土壤拌种法出现叶片变黄症状,注射接种法于90d时茎基部出现变黑的症状,土壤拌种法却无变黑症状。对注射接种法和土壤拌种法的病基部部分离,纯化,确定有变黑轮枝菌的存在。6.对54个向日葵品种进行土壤拌种接种,均出现不同程度症状反应,根据黄萎病的分级标准,21个品种表现免疫(I),25个高抗(HR),8个抗病(R),不同品种之间的抗病程度不同。由于平均病情指数均在30.0以下,所以变黑轮枝菌致病力为弱致病性。