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猪巨细胞病毒感染(porcine cytomegalovirus infection,PCMVI)是一种条件性传染病,由疱疹病毒科β-疱疹病毒亚科的猪巨细胞病毒(porcine cytomegalovirus,PCMV)引起。该病于1955年首次在英国发现,在猪群中广泛流行,凡是有猪只饲养的地区,都有可能感染本病毒。欧洲、北美、和日本PCMV的血清抗体阳性率为90%以上,在感染猪群中,98%的猪血清抗体为阳性。根据Gen Bank中发表的猪巨细胞病毒基因组序列的分析,设计引物对PCMV进行PCR检测。通过相关参考文献建立的PCR、RT-PCR方法,对猪相关发热病病原中的猪圆环病毒2型(porcine circovirus type2,PCV-2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)、猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)等主要病毒的感染情况进行检测,以便探究PCMV与猪发热病的关系。采集来自江苏扬州、盐城、宝应、靖江等地区的200份商品猪鼻拭子,26份病猪鼻拭子及各脏器病料进行检测,结果发现：在采集的200份商品猪鼻拭子中,东台猪场PCMV的检测阳性率为9%(9/100)；宝应猪场PCMV的检测阳性率为31%(31/100)；在26份鼻拭子和病料中有14份检出PCMV,阳性率为53.8%；其中鼻拭子检出率为38.5%,病料检出率为15.4%；PCMV和PRRSV昆合感染的阳性率最高,26份病料中有12份,混合感染率为46.2%；其次是PCMV与PCV-2的混合感染,26份中有6份,阳性率为23.1%；与CSFV的混合感染率为4%；有4份为PCMV、PRRSV和PCV2的三重感染,占总数的15.4%；另有1份为PCMV、PRRSV与CSFV的三重感染。PCMV与引起猪发热病的病原的相关性较高。用上述PCMV引物对样品进行PCR检测,经测序后与GenBank的PCMV gB基因进行同源性比较,结果同源性在98.0%-100%之间,应用MEGA5.05软件对gB基因的序列进行了遗传进化树分析。PCR扩增gB基因并回收,将其克隆入载体质粒pUCm-T,将目的片段与原核表达载体pGEX-6p-1连接,转化入大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,由SDS-PAGE电泳分析证实gB基因获得了表达,重组蛋白分子量分别约为48Ku,命名为GST-gB。重组蛋白GST-gB以包涵体的形式存在。以抗PCMV血清为一抗,经Western-blot分析证实表达的融合蛋白抗原性良好。用重组菌(pGEX-gB)诱导表达融合蛋白(GST-gB),经过纯化后的蛋白作为免疫原,免疫3kg左右的新西兰兔2只。三次免疫后用间接ELISA方法检测抗体效价,抗体的有效稀释效价可达到1：25600。制备高效价的抗体是验证基因表达和研究基因功能的首要前提,目前诊断PCMV感染的方法主要是传统的血清学诊断法及后来发展的PCR方法,因此对其基因进行抗原性分析及制备GST-gB抗体可促进相关研究的开展。