【摘 要】
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目的:本研究旨在探讨D-4F是否可以促进小鼠脊髓损伤后神经功能的恢复及其可能的治疗机制。方法:将C57BL/6J小鼠随机分为假手术组、脊髓损伤组和治疗组,并利用细钳钳夹小鼠胸段（T10）脊髓构建小鼠脊髓损伤模型。免疫细胞化学染色用来评估巨噬细胞在体外实验中,分别在对照组（只加荧光髓磷脂）,D-4F组,以及D-4F加ABCA1通道抑制剂组中,在不同的浓度下的髓磷脂排出情况;组织免疫荧光染色用于检测脊
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目的:本研究旨在探讨D-4F是否可以促进小鼠脊髓损伤后神经功能的恢复及其可能的治疗机制。方法:将C57BL/6J小鼠随机分为假手术组、脊髓损伤组和治疗组,并利用细钳钳夹小鼠胸段（T10）脊髓构建小鼠脊髓损伤模型。免疫细胞化学染色用来评估巨噬细胞在体外实验中,分别在对照组（只加荧光髓磷脂）,D-4F组,以及D-4F加ABCA1通道抑制剂组中,在不同的浓度下的髓磷脂排出情况;组织免疫荧光染色用于检测脊髓损伤前和损伤后3、7、14、28天髓磷脂在损伤部位的累积及ABCA1的表达情况,以及损伤后28天的神经恢复情况;油红染色用于检测巨噬细胞在体外实验中,分别在对照组（只加髓磷脂）,D-4F组,以及D-4F加ABCA1通道抑制剂组,在不同的浓度下的髓磷脂排出情况,以及体内实验中脊髓损伤后3、7、14、28天髓磷脂在损伤部位的累积情况;蛋白质印迹法用于检测脊髓损伤前和损伤后3、7、14、28天ABCA1的表达情况,以及巨噬细胞在对照组,髓磷脂组,髓磷脂加D-4F组,D-4F组中的髓磷脂排出及ABCA1的表达情况;小鼠运动功能评分用于评估小鼠脊髓损伤后神经功能的恢复情况。实验对象的随机分配、小鼠脊髓损伤模型的建立、数据采集、数据分析等研究过程均遵守“盲法”。结果:（1）RAW 264.7细胞吞噬髓磷脂碎片24小时,当髓磷脂碎片浓度为0.5 mg/ml时吞噬达到饱和,而D-4F可以促进泡沫型巨噬细胞髓磷脂碎片的排出,其作用的最佳浓度可能为50μg/ml,并且具有统计学意义（P＜0.05）;（2）D-4F可以促进脊髓损伤后损伤核心髓磷脂碎片的清除以及泡沫型巨噬细胞的减少,并且具有统计学意义（P＜0.05）;（3）D-4F可改善脊髓损伤后小鼠的神经功能和运动功能,治疗组的纤维瘢痕的面积减少,且5-HT轴突和NFH轴突得到保护,差异具有统计学意义（P＜0.05）;（4）D-4F上调了ABCA1的表达,并可能通过ABCA1通路在脊髓损伤后损伤中心的泡沫型巨噬细胞的脂质外排中发挥作用。并且具有统计学意义（P＜0.05）;（5）通过体外抑制RAW 264.7细胞上ABCA1的表达,间接证明了D-4F可能通过ABCA1通路来促进泡沫型巨噬细胞对髓磷脂碎片的清除,并且差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论:我们的研究发现了一种治疗脊髓损伤的药物D-4F。D-4F被证实可以促进损伤核心髓鞘碎片的清除、泡沫型巨噬细胞的减少、神经保护和损伤后运动功能的恢复。这些发现为脊髓损伤的治疗提供了新的研究方向和证据。
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