论文部分内容阅读
DEPDC1(DEP domain containing 1)是近年来发现的一个肿瘤相关基因,前期研究结果表明DEPDC1在鼻咽癌细胞周期以及癌变过程中具有重要作用。目的:为了更进一步探讨其在鼻咽癌发生发展中的作用。方法:利用qRT-PCR和免疫组织化学染色分别检测DEPDC1在33例新鲜鼻咽癌组织样品和44例鼻咽癌组织芯片中的表达情况。人鼻咽癌细胞株CNE-1稳定沉默DEPDC1后,流式细胞技术检测细胞周期,CCK8检测细胞增殖,transwell分析细胞侵袭迁移的情况,利用裸鼠成瘤试验分析体内成瘤能力。结果:DEPDC1在鼻咽癌组织中表达量(0.699±0.521)明显高于鼻咽部正常组织(0.408±0.183),差异有统计学意义(P<0.05)。DEPDC1稳定沉默后,CCK8检测结果表明CNE-1细胞增殖速度减慢;流式细胞检测结果显示,G1期细胞减少,G2/M期细胞增多,细胞周期进程受阻。划痕及Transwell实验结果表明,DEPDC1稳定沉默明显减弱了CNE-1细胞运动、侵袭及迁移能力(77.033±5.183 20.137±2.828)(107.336±5.033 26.326±1.414),差异均有统计学意义(P<0.05)。进一步定量qRT-PCR及Western印迹检测发现,DEPDC1稳定沉默导致上皮细胞标志分子Ecadherin(0.457±0.022)显著上调、而间质细胞标志分子Vimentin(0.780±0.063)、Ncadherin(0.780±0.063)以及EMT上游关键转录因子Twist1(0.710±0.034)下调(P<0.05)。裸鼠成瘤实验表明DEPDC1稳定沉默后抑制了裸鼠成瘤能力,与对照组(0.23±0.03g,46.91±15.07mm3)相比,DEPDC1稳定沉默后肿瘤重量和体积(0.56±0.17g,546.24±93.46mm3)明显减小,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:本研究成功构建了DEPDC1稳定沉默的鼻咽癌细胞株,与前期siRNA介导的瞬时沉默相似,DEPDC1稳定沉默可抑制鼻咽癌细胞的增殖、侵袭迁移,并改变EMT关键分子的表达,为进一步探索DEPDC1在鼻咽癌中的作用机理奠定了基础。