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采用溶胶-凝胶法制备了Fe3O4@SiO2-NH2,利用单因数实验考察分析了氨基修饰过程中TEOS浓度、APTES含量、温度及时间对氨基含量的影响,获得了具有较高氨基含量的磁性固定化载体,并将各阶段生成物进行了表征。确定了溶胶-凝胶法制备纳米载体颗粒过程中最适修饰反应时间为8 h,延长反应时间对氨基含量的影响并不大。在反应温度为80℃,TEOS含量为2 mL,APTES含量为5 mL条件下所制得的磁性纳米载体的氨基含量可达到最高值1.22 mmol/g。TEM和SEM分析表明所制得的磁性纳米载体直径为20-40 nm,VSM的分析结果表明磁性Fe3O4@SiO2-NH2复合粒子的饱和磁化强度约等于49 emu/g,具有超顺磁特性,同时XRD、FI-IR、TG的结果也间接表明富含氨基的磁性纳米载体颗粒已经成功制备。通过单因素分析和正交分析研究了果胶酶固定化过程中戊二醛浓度、果胶酶含量、pH、温度及交联反应时间等条件对固定化果胶酶活力的影响,获得了磁性固定化酶的最优固定化条件,确定了影响固定化果胶酶固定化效果的四个因素,其大小顺序依次是:戊二醛浓度>pH>温度>交联时间,固定化果胶酶的最佳实验条件分别为:0.2 g磁性纳米载体与浓度为3%的戊二醛2 m L为反应后,加入20 mL酶活为32.4 U/mL的果胶酶,于50℃、pH 8.0,交联时间为8小时条件下反应所得到的固定化果胶酶的酶活回收率最高为73.5%。VSM的分析结果表明磁性Fe3O4@Si O2-NH2固定化果胶酶粒子的饱和磁化强度约等于32 emu/g,具有良好的磁回收性能。运用SEM、XRD、TG、VSM和FT-IR对磁性固定化果胶酶进行表征结果表明果胶酶已经被成功固定。酶学性质研究表明,自由酶与固定化果胶酶最佳反应pH都为8.5,自由酶的最适反应温度为50℃,而固定化果胶酶为55℃。自由酶与固定化果胶酶的最佳pH稳定值都为8.5,固定化果胶酶的温度稳定性要略高于自由酶的温度稳定性,在所测温度为30-70℃范围内,自由酶的酶活下降了46.5%,而固定化果胶酶下降了41.4%。自由酶在存储30天后损失了大约18.5%的酶活,但固定化果胶酶的只有约10.4%的酶活损失。固定化果胶酶经过7次连续使用后,仍有64.4%的果胶酶活性得以保留。自由酶的Km=6.11 mg/mL,固定化果胶酶的Km=7.42 mg/m L,而自由酶(Vm=2.41 mg/mL?min)与固定化果胶酶(Vm=2.53 mg/m L?min)则相差不大。