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背景和目的目前淋巴造血系统恶性肿瘤的发病率呈逐年上升趋势，患者数正以每年4％的速度增加。综合治疗是目前治疗淋巴造血系统肿瘤的常用手段，但疗效不尽如人意，比如化疗药物毒副作用较大、治愈率低、本病具有侵袭性、原发或继发耐药往往导致治疗失败，所以有必要寻求更好的治疗方法和有效低毒的抗癌药物!张明智教授在多年的临床工作中发现夏枯草具有抗肿瘤作用，并且经文献检索发现有多篇相关报道，但淋巴造血系统恶性肿瘤的研究较少。所以我们研究组开展了相关研究，进一步证实夏枯草抗淋巴造血系统恶性肿瘤的疗效、作用机制、有效成分，为夏枯草大批量用于临床提供理论依据。夏枯草为唇形科夏枯草属植物，其性寒、味苦、辛，具有清火明目、祛炎消肿、软坚散结之功效。常用于目赤肿痛、头痛眩晕、瘰病、乳痛、甲状腺肿大、急性扁桃体炎、咽喉肿痛、高血压。民间流传应用夏枯草治疗甲状腺癌、淋巴肉瘤、腮腺癌、扁桃腺癌、鼻咽癌、乳腺癌、宫颈癌、肝癌等病症由来已久。现代药理学研究证明：夏枯草具有广泛的药理活性，在体外体内实验中均提示它具有抗肿瘤效应。但是，目前关于夏枯草抗肿瘤活性的研究仍然集中在粗提物，提取有效的抗肿瘤单体相关报道还很少见，因此这方面的研究有很大的意义。本课题通过体内抗肿瘤实验方法观察了经醇煎法制成的夏枯草提取物体内抗小鼠T淋巴瘤细胞EL-4活性，并应用分子生物学技术初步探讨了夏枯草体内抗肿瘤作用的可能机制，为其临床应用提供实验依据。方法1．EL-4细胞生长于含10％胎马血清的DMEM高糖培养液中，置37℃，5％CO2保湿培养箱内。待细胞生长至对数期时，收集细胞，用无菌生理盐水配制成1×107/ml的单细胞悬液，于C57BL/6小鼠右腋下行无菌皮下接种，接种量0.2ml细胞悬液/只。待EL-4细胞在小鼠体内稳定传代后，处死EL-4荷瘤鼠，于超净工作台内，在无菌条件下从腋部皮下剥取肿瘤组织，制成瘤细胞悬液。调细胞浓度为4×105个/mL。取上述瘤细胞悬液0.2mL（含瘤细胞数8×104个）接种于C57BL/6小鼠右腋部皮下。2．接种后第二天，将荷瘤小鼠随机分为5组，每组10只：夏枯草提取物大、中、小剂量组，经腹腔分别注射夏枯草提取物500mg/kg/d、300mg/kg/d、100mg/kg/d，连续给药10天；阳性对照组，经腹腔注射CTX 20mg/kg/d，第一至三天给药；阴性对照组，经腹腔注射等容量无菌生理盐水，连续注射10天。观察夏枯草提取物对荷瘤小鼠的抑瘤率以及对平均生存时间的影响。3．留取肿瘤组织标本，应用HE染色法对夏枯草提取物中剂量组及阴性对照组的肿瘤组织行病理形态学观察。4．免疫组织化学法检测夏枯草提取物中剂量组及阴性对照组的肿瘤组织中bcl-2与bax蛋白表达情况。统计学处理应用统计软件SPSS10.0进行统计学处理，统计方法采用t检验和χ2检验。以α=0.05作为检验水准。结果1．夏枯草提取物对小鼠T淋巴瘤细胞EL-4具有明显的抑瘤效应，抑瘤率分别为39.54％，65.26％，22.30％。夏枯草提取物各剂量组小鼠平均瘤重分别为1.4054g，0.8075g，1.8055g，与阴性对照组2.3246g相比较，夏枯草各剂量组差异均有统计学意义（P＜0.05），中剂量组与大剂量组和小剂量组之间差异均有统计学意义且抑瘤率最大，而夏枯草提取物小剂量组和大剂量组平均瘤重之间的差异无统计学意义（P＞0.05）。CTX组小鼠给药前后体重差异具有统计学意义（P＜0.05），给药后体重较给药前明显减轻，夏枯草各剂量组小鼠给药前后体重变化均不明显，无统计学意义（P＞0.05）。2．夏枯草提取物大、中、小剂量组及CTX组荷瘤小鼠的平均生存时间（25.50天，28.50天，24.86天，27.50天）明显长于阴性对照组（22.67天），差异均具有显著性（P＜0.05）。三个夏枯草提取物用药组中，中剂量组对荷瘤小鼠生存期的延长最为明显，与CTX组相比，无统计学意义（P＞0.05）；而大剂量组与小剂量组小鼠平均生存期差异无统计学意义（P＞0.05），与CTX组相比，大剂量组无统计学意义（P＞0.05），小剂量组有统计学意义（P＜0.05）。3．HE染色组织病理学观察可见夏枯草提取物中剂量组有较多的肿瘤坏死区。4．免疫组织化学法检测夏枯草提取物中剂量组与阴性对照组肿瘤组织相比，Bcl-2蛋白表达降低，Bax蛋白表达增加。结论1．夏枯草提取物对小鼠T淋巴瘤细胞EL-4具有明显的体内抑瘤效应。2．诱导肿瘤细胞凋亡是夏枯草提取物抗肿瘤作用机制之一。3．夏枯草提取物可明显延长荷瘤小鼠的平均生存时间。