沙眼衣原体基因分型的初步研究

来源 :重庆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:feng_zj
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该文采用聚合酶链反应(Polymerase chain reaction, PCR)单链构象多态性(Single-strand coformation polymorphism, SSCP)对Ct作基因分型.首先评估PCR中所用的引物对,然后对PCR产物作SSCP.分别采用细胞培养与聚合酶链反应对沙眼衣原体进行检测.PCR所用引物分别来自Ct的7.5Kb隐蔽性质粒及主要外膜蛋白结构基因(omp<,1>).502例育龄期妇女宫颈刮取物细胞培养阳性145例,Ct检出率为28.9%,其中220例再以质粒为引物作PCR检测,与细胞培养相比,质粒PCR敏感性为90.6%,特异性为98.1%.另有426份随机采取的临床标本,92例质粒PCR阳性,Ct检出率21.6%.92份阳性标本中有66例omp<,1>PCR阳性,质粒PCR阴性标本omp<,1>PCR均为阴性,omp<,1>PCR敏感性为71.7%,特异性为100%.由于质粒PCR的敏感性高于omp<,1>PCR,可作为Ct筛检的理想方法.对52例omp<,1>PCR阳性标本作SSCP分析,结果显示7种不同的电泳图谱,18例与E血清型标准株相同,34.6%(18/52).其中两份标本分别取自羊水及新生儿睑结膜,两株CtSSCP图谱相同,表明为同一菌株,在分子水平上证实了Ct的垂直传播.该文还就SSCP实验条件的优化、重现性及影响因素进行了探讨.用SSCP对Ct进行基因分型具备核酸测序分型法及限制性片段长度多态性分型法二者的长处,操作简便、快速、敏感生好,是一种极具潜力的Ct分型的新方法.
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