广宁红花油茶是山茶科山茶属油茶组的一个重要物种。广宁红花油茶及其饼粕尤其富含具有多种生物活性的黄酮类和皂苷等化合物。目前,对油茶饼粕的研究主要集中在以总黄酮或皂苷为指标进行的各种提取工艺的优化,还有一些着重于对得到的粗提物或初步纯化物进行抗氧化以及抑菌等活性方面的研究。但是,对提取物中具体成分的研究很少,而且主要还只是针对一些常见的化合物进行分析。基于此,本文将主要研究广宁红花油茶饼的醇提物的分离纯化,并对得到的单体物质进行结构鉴定。具体内容及结论如下:(1)广宁红花油茶饼粗提液中的黄酮类化合物的抗氧化能力探究本试验以有机溶剂法(乙醇)对广宁红花油茶饼中的成分进行提取,得到粗提液。然后以芦丁标准品作为对照,测定粗提物中的黄酮含量,同时测定粗提物对DPPH自由基、ABTS自由基以及羟自由基的清除能力。结果表明:广宁红花油茶饼的60%乙醇提取液,具有很强的DPPH自由基、ABTS自由基及羟自由基清除活性,其IC50分别为8.64、15.944和20.40 μg/mL,在一定的浓度范围内,其各种自由基清除率与其各自的浓度呈正相关。(2)广宁红花油茶饼粗提液中活性成分的分离纯化本试验先以等体积乙酸乙酯溶液对广宁红花油茶饼的粗提液进行了多次反复萃取,然后以硅胶柱层析法对其进行分离纯化。其中,以不同比例的二氯甲烷-甲醇溶液为洗脱剂,进行梯度洗脱,分别收集流出液,以硅胶板薄层色谱法对接收的流出液进行合并。然后对其中得到的4个组分进行高效液相色谱分析和制备。得到了质量较大的5个化合物单体,且这些化合物的纯度均大于95%。具体为:从Fr.36-39组分中分离制备得到化合物1;Fr.66组分中分离制备得到化合物2;Fr.67-69组分中分离制备得到化合物3和4;Fr.90-97组分中分离制备得到化合物5。(3)单体化合物的结构鉴定对得到的5个单体化合物进行结构解析。本次试验主要采用LC-QTOF-MS和 NMR(1H-NMR、13C-NMR、H-HCOSY、HMBC、HSQC、TOCSY)法进行解析,并通过结合文献资料最终确定出5个化合物的结构,分别为:原儿茶酸(1),芹菜素-6-β-D-吡喃葡萄糖甙(2),山奈酚3-O-α-L-鼠李糖基(1→,3)(4’"-乙酰基)-α-L-鼠李糖基(1→6)-β-D-半乳糖甙(3),山奈酚3-0-[α-L-吡喃鼠李糖-(1→3)-2,4-0-乙酰基-α-L-吡喃鼠李糖-(1→6)-]-β-D-吡喃葡萄糖苷山奈酚3-O-α-L-鼠李糖基(1→3)(4’"-乙酰基)-α-L-鼠李糖基(1→6)-β-D-半乳糖甙(4)和山奈酚3-O-[α-L-鼠李糖-(1→3)-α-L-鼠李糖-(1→6)]-β-D-葡萄糖甙(5)。其中,化合物3为山茶属植物中第一次报道;而化合物4是山茶属植物的种籽中第一次提取得到;化合物5则是广宁红花油茶中首次提取得到。