目的:研究携带有转录因子（Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc）的腺病毒感染小鼠胚胎成纤维细胞(MEFc)，通过诱导出诱导多能干细胞　　（iPSC），并分析在重编程过程中p53基因、MDM2基因、Aurka基因的变化规律，为提高诱导多能干细胞诱导效率提供思路。　　方法：1.对前期冻存的MEFc进行复苏，待MEFc生长良好后，加入带有4个转录因子（OSCK）的腺病毒，反复感染两次后，观察细胞形态结构变化；2.对诱导出的细胞进行多能性鉴定：通过对细胞形态学观察、成瘤性、碱性磷酸酶(偶氮偶联法)染色，及干细胞标志基因检测；3.将转染的细胞分别按照诱导前、诱导后24h、诱导后1w、诱导后2w四个时间段，利用Real-Time PCR技术，多次测量p53基因、MDM2基因、Aurka基因的转录情况。实验数据应用SPSS17.0软件进行统计学分析，各个基因内各个时间的数据采用单因素方差分析，统计学检验标准为P<0.05。　　结果：1.对诱导的细胞进行多能性鉴定：a、形态学变化：可观察到细胞边界轮廓清楚，胞体较小鼠成纤维细胞变大，变圆，长度变短，少数呈多变性，仍有明显突起，但突起长度变短。b、成瘤性观察：约7-8周后可见到大鼠根部明显2-3个畸胎瘤，用手触及包块质中等硬度，可滑动，与周围组织无粘连，表面光滑。取出包块组织，可见到包块淡红色块椭圆形柱状物，大小为约1cm×0.5cm×0.3cm。将取下的组织行切片、HE染色处理，可见细胞核成蓝色，胞质成粉红色，在中可见到大量杯状细胞组成的腺体组织、血管、大量的脂肪组织。c、碱性磷酸酶鉴定：可见大量碱性磷酸酶阳性颗粒。d、干细胞标志基因检测：Oct4、Sox2及Nanog在诱导的细胞中均有表达。2.在诱导过程中p53转录变化规律：1、转染前与转染后24h、转染后1w、转染后2w比较，相对表达量差异显著（P<0.05）。2、转染后24h与转染后1w及转染后两周比较，差异显著，具有统计学意义(P<0.05)。3.转染后1w与转染后两周比较，差异显著，具有统计学意义(P<0.05)。p53的转录在四因子腺病毒转染后24h既出现升高，在转染1w后较高，而在转染2w后出现下降。在诱导过程中MDM2转录变化规律:1、转染前与转染后24h、转染后1w、转染后2w比较，RQ差异显著，具有统计学意义（P<0.05）。2、转染后24h与转染后1w及转染后两周比较，差异显著，具有统计学意义(P<0.05)。3、转染后1w与转染后两周比较，差异显著，具有统计学意义(P<0.05)。MDM2的转录在四因子腺病毒转染后24h出现下降，1w时下降明显，而在转染2w后却出现升高。与p53基因的变化规律成反比。在诱导过程中AURKA转录变化规律:1、转染前与转染后24h、转染后1w，RQ差异显著，具有统计学意义（P<0.05），与转染后2w比较， RQ差异不显著（P>0.05）。2、转染后24h与转染后1w及转染后2w比较，差异显著，具有统计学意义(P<0.05)。3、转染后1w与转染后2w比较，差异显著，具有统计学意义(P<0.05)。可认为Aurka的转录在四因子腺病毒转染后出现明显升高，1w时较转染后仍高，而在转染2w呈现与正常水平,且Aurka的转录升高水平明显高于p53基因。通过利用MDM2与Aurka的抑制剂发现细胞p53蛋白表达均明显升高。　　结论1.细胞的重编程过程能够激活p53信号通路，p53转录在转染2w后出现下降，考虑重编程已经完成，可考虑干预重编程过程的时间在2w内。2.细胞重编程过程中MDM2水平下降，通过利用MDM2拮抗剂在诱导多能干细胞中发现p53蛋白表达明显增加，可以通过对MDM2-p53信号通路的作用,影响诱导效率。3.细胞重编程中Aurka的表达水平上调，通过利用VX-680抑制Aurka能够使p53蛋白表达明显增加，同时也能抑制p53传导通路，减少P53引起的抑制作用。