艾灸胃经穴治疗慢性萎缩性胃炎大鼠的代谢组学研究

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目的:研究艾灸干预胃经穴对慢性萎缩性胃炎大鼠血清、胃、延髓和大脑皮层组织的影响,探讨艾灸胃经穴促进慢性萎缩性胃炎大鼠胃黏膜损伤修复的病理学变化和相关分子机制及代谢轮廓变化等。方法:24只清洁级SD大鼠按随机数字表法随机分为4组,即正常组、模型组、艾灸胃经穴组、艾灸非穴位组,每组各6只。除正常组外,其余三组利用每日交替自由饮用氨水溶液(0.1%)和脱氧胆酸钠溶液(20mmol/L)结合饥饿障碍法制备大鼠慢性萎缩性胃炎模型,然后用艾灸分别刺激艾灸胃经穴组大鼠和艾灸非穴位组大鼠相关部位。收集大鼠的血清、胃、延髓和大脑皮层组织,采用智能生物显微镜下观察各组大鼠胃黏膜病理学变化、酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay ELISA)检测脑肠肽(P物质和饥饿素)、核磁共振波氢谱(1H NMR)技术等方法检测艾灸胃经穴对慢性萎缩性胃炎大鼠血清及胃黏膜、延髓和大脑皮层组织代谢物,获取一维1H NMR谱,并利用多变量统计方法识别各组大鼠血清、胃黏膜、大脑皮层组织和延髓代谢轮廓的变化以及相关分子机制,探讨艾灸胃经穴促进慢性萎缩性胃炎大鼠胃黏膜损伤修复的细胞形态学变化和相关分子机制及代谢轮廓变化等。结果:大鼠胃黏膜组织病理切片结果显示:正常组大鼠胃黏膜单层柱状上皮细胞和腺体排列整齐,胃黏膜完整性未遭到破坏,腺体和黏膜没有充血和水肿。模型组中可清楚地看到胃黏膜层的腺体细胞和腺管减少,在细胞和淋巴细胞中可见明显细胞浸润,细胞排列明显错乱。艾灸胃经穴组大鼠胃黏膜不同程度改善,腺体保持相对完整,炎症细胞浸润主要局限于胃黏膜表层。艾灸非穴位组中可观察到腺体形态不完整和细胞排列不规则。各组大鼠胃黏膜组织的ELISA检测结果显示,与正常组相比,模型组大鼠胃粘膜组织中P物质和饥饿素(Ghrelin)的表达水平显著降低(P<0.05);与模型组相比,艾灸胃经穴组、艾灸非穴位组大鼠胃黏膜组织中P物质和Ghrelin蛋白的表达水平均发生上调(P<0.05),而艾灸胃经穴组大鼠胃黏膜组织中P物质和Ghrelin蛋白的表达水上调最为明显,明显强于艾灸非穴位组。代谢组学检测结果显示,与正常组相比,模型组发生明显变化;与模型组相比,艾灸胃经穴组大鼠血清、胃、髓质和大脑皮层组织中代谢物的表达水平有了明显的恢复,更靠近正常对照组大鼠的代谢水平,具有统计学意义(P<0.05)。与模型组进行比较,艾灸胃经穴组大鼠胃黏膜组织中代谢物的表达水平明显升高,更靠近正常组大鼠的代谢水平,具有统计学意义(P<0.05)。结论:艾灸胃经穴可调节慢性萎缩性胃炎大鼠的细胞形态和相关的分子机制表达及代谢轮廓的改变,说明了艾灸胃经穴对慢性萎缩性胃炎有确切的治疗作用。对于揭示慢性萎缩性胃炎的发病机制及找出一种方便、安全有效、无毒副作用、廉价的治疗方法可能具有重要价值。
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