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辣椒素(capsaicin, CAP)是红辣椒中的主要成分,它可以选择性的激活感觉神经元,向中枢神经系统传导伤害性刺激从而产生灼痛。树胶脂毒素(resiniferatoxin, RTX)属于辣椒素的高效能类似物,与辣椒素在结构上有显著的不同,却有相似的生物学活性。CAP和RTX都可以与辣椒素受体(transient receptor potential vanilloid typel, TRPV1)结合,在治疗神经源性炎症等方面可发挥重要的作用。TRPV1是存在于细胞膜上的一种非选择性的配体门控性阳离子通道,是感受伤害性刺激的分子感受器,在伤害性刺激信息转导过程中起着关键作用。TRPV1对于炎性热痛觉过敏的形成是至关重要的,被认为是疼痛调节的关键物质。背根神经节(dorsal root ganglion, DRG)是感受伤害性刺激的初级传入神经元胞体所在的部位。其中对CAP敏感的感觉神经元可表达TRPV1,这类神经元大多数的是中、小直径的神经元,其神经纤维为无髓的C类纤维或薄髓的A6纤维,主要传导痛觉的刺激。CAP通过与该类神经元上的TRPV1结合,激活与受体直接偶联的膜离子通道,可引发神经肽的释放。P物质(substance P, SP)是一种由感觉神经纤维末梢分泌的,分布于感觉神经支配的外周组织的神经肽。SP的释放基于适度的刺激,它在伤害性感觉以及神经源性炎症发生机制中起着重要作用。大部分TRPV1免疫反应阳性的DRG神经元表达SP,SP的释放与TRPV1的激活密切相关。CAP和RTX对间质性膀胱炎等神经源性疾病的潜在的治疗作用越来越受到重视,但二者在对TRPV1的亲和力、感觉神经肽的耗竭以及初级传入神经元神经毒性等方面存在差异,有待于进一步阐明。本实验旨在探讨,不同浓度CAP和RTX对培养的DRG神经元SP的释放及TRPV1表达影响的异同。本实验将原代培养的15 d胎鼠DRG神经元,在体外分散培养72 h后,分别用CAP (1μmol/L,10μmol/L)和RTX (10 nmol/L,100 nmol/L)进行处理10 min,然后用放射免疫分析法(radioimmunoassay, RIA)检测感觉神经肽SP的释放,并更换培养液再培养6 d。再用RIA测定SP的释放,用RT-PCR方法检测编码SP的前速激肽原(preprotachykinin, PPT) mRNA和TRPV1 mRNA的表达,用Western blot方法检测SP和TRPV1蛋白的表达。本实验结果如下：(1)CAP或RTX急性刺激对SP释放的影响用RIA法检测CAP或RTX引发的DRG神经元SP的释放,结果显示：分散培养72 h的DRG神经元受CAP或RTX刺激10 min后,SP释放较对照组显著增加。刺激后6 d,SP释放较对照组减少。(2)CAP或RTX对PPT mRNA和TRPV1 mRNA的影响分散培养3 d的DRG神经元受CAP或RTX刺激10 min后,更换新培养液继续培养6 d,用RT-PCR检测PPTmRNA和TRPV1mRNA的表达水平。结果显示：CAP或高浓度RTX使PPTmRNA和TRPV-1mRNA水平下降,而低浓度的RTX则对其没有影响。(3)CAP或RTX对SP和TRPV1蛋白表达的影响分散培养3 d的DRG神经元受CAP或RTX刺激10 min后,更换新培养液继续培养6 d,用Western blot检测SP和TRPV1蛋白的表达,结果显示：DRG神经元SP的表达在CAP和RTX作用下均下降,而TRPV1的表达在CAP和高浓度RTX中下降,在低浓度RTX没有显著变化。以上实验结果表明,CAP或高浓度RTX对DRG神经元有神经毒性,而低浓度RTX对DRG神经元急性刺激后,其神经元SP或TRPV1的表达能力在培养一段时间后,可以部分恢复。RTX作用的可逆性以及其潜在的治疗能力,使之将更加广泛的应用于疼痛和神经源性炎症的治疗。