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宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一，性传播疾病和HPV感染使其发病年龄逐渐趋向于年轻化，由于广泛开展宫颈癌预防普查，子宫颈癌的早期诊断率大大提高，子宫颈癌患者生存率得到提高。文献报告宫颈癌中HPV的检出率可以达到90％以上。HPV是一种环状双链结构的DNA病毒，由8000左右碱基对组成。高危型HPV E6、E7基因编码的原癌蛋白是导致宫颈癌的重要原因。它们均为小分子蛋白，分别含有158个和98个氨基酸，具有锌指结构。这种锌指结构与细胞的恶性转化密切相关。表达了E6、E7原癌蛋白的体外培养细胞能继续增殖到永生化，这种永生化可能是肿瘤发生的前奏。转基因研究还发现高危型HPV E6、E7能直接导致肿瘤形成。目前已经有学者研制成功了HPV疫苗，宫颈癌的发病率可能将会明显下降。基因治疗是以后肿瘤治疗的一个趋势，但有关宫颈癌特异性基因的研究的报道很少，影响了宫颈癌基因治疗进展。WAPL基因是在果蝇体内发现的一个基因，在人体内的同源序列称为HWAPL基因，其具体作用可能与染色体的稳定有关。Oikawa等发现宫颈癌相对于卵巢癌、乳腺癌、肺癌、肾癌、结肠癌及其相应的正常组织，HWAPL基因的mRNA表达升高更明显，相对于其他细胞系，宫颈癌细胞系中HWAPL有更高程度的表达。初步推测HWAPL基因可能是一种宫颈癌特异性高表达基因，推动了宫颈癌基因治疗的研究进展。本试验研究目的在于检测出宫颈癌石蜡标本中HPV并进行分型，为用石蜡标本对HPV研究提供理论依据；同时结合HWAPL蛋白免疫组化的结果，从临床角度找出高危型HPV与HWAPL基因之间的关系，为以后宫颈癌的预防和基因治疗的研究提供理论依据。材料和方法收集2004年2月到2006年2月郑州大学第二附属医院75例宫颈石蜡标本。30例宫颈鳞癌，患者术前均未进行放疗或化疗，年龄29～57岁，平均年龄43岁。45例宫颈上皮内瘤变(CIN)，包括CINⅠ级15例、CINⅡ级15例、CINⅢ级15例，年龄24～50岁，平均年龄37岁。采用普通PCR技术和基因芯片检测技术，检测出标本中的HPV并对之进行分型。结合HPV分型结果和HWAPL蛋白免疫组化研究结果，找出HPV分型与HWAPL基因之间的关系。用SPSS10.0软件系统对数据进行分析，以α=0.05作为判断显著差异的标准。结果(1)30例宫颈鳞癌石蜡标本中28例(93.3％)普通PCR扩增后显示HPVDNA阳性，基因芯片检测显示27例(90％)显示HPV16/18阳性，1(3.3％)例显示HPV6阳性；15例CINⅢ石蜡标本中14例(93.3％)普通PCR扩增后显示HPVDNA阳性，基因芯片检测显示10例(66.7％)HPV16/18阳性，1例(6.7％)58型阳性，3(20％)例HPV6/11阳性；15例CINⅡ石蜡标本中14例(93.3％)普通PCR扩增后显示HPV DNA阳性，基因芯片检测显示11(73.3％)例HPV 6/11阳性，3例(20％)HPV16/18阳性；15例CINⅠ石蜡标本中12例(80％)普通PCR扩增后显示HPV DNA阳性，基因芯片检测显示10例(66.7％)HPV6/11阳性，2例(13.3％)HPV16/18阳性。与CINⅠ、CINⅡ比较，宫颈癌和CINⅢ中高危HPV感染所占比率较大，差异有统计学意义(χ~2=32.248，P=0.001)；(2)30例宫颈癌标本中HWAPL蛋白表达强度5例(16.7％)为弱阳性(+)，8例(26.7％)为阳性(++)，17例(56.7％)为强阳性(+++)；15例CINⅢ标本中HWAPL蛋白表达强度4例(26.7％)为+，4例(26.7％)为++，7例(46.7％)为+++；15例CINⅡ标本中6例(40％)为+，5例(33.3％)为++，4例(26.7％)为+++；15例CINⅠ标本中HWAPL蛋白表达强度7例(46.7％)为+，6例(40％)为++，2例(13.3％)为+++。宫颈癌和CINⅢ中HWAPL蛋白表达强度远远高于CINⅠ和CINⅡ中，差异有统计学意义(χ~2=8.928，P=0.012)；(3)HPV阴性的7例标本中4例(57.1％)HWAPL蛋白表达为+，2例(28.6％)为++，1例(14.3％)为+++；低危HPV感染的26例标本中12例(46.2％)HWAPL蛋白表达为+，9例(34.6％)为H，5例(19.2％)为+++；检测出高危HPV的42例标本中6例(14.3％)HWAPL蛋白表达为弱阳性+，12例(28.6％)为++，24例(57.1％)为强阳性+++。高危HPV感染的标本与低危HPV感染的标本及HPV阴性标本相比较HWAPL蛋白表达强度差异有统计学意义(χ~2=14.844，P=0.005)。Spearmen相关性分析显示高危HPV感染与HWAPL基因表呈正相关(r=0.440，P=0.000)。结论(1)宫颈癌石蜡标本中可以检测出93.3％HPV DNA,可用作宫颈癌HPV感染的研究手段；(2)基因芯片技术有自动化、通量大、准确率高、特异性强等优点可以作为临床HPV检测和分型的常用手段；(3)宫颈癌中HWAPL基因呈高表达，高危HPV感染可增强HWAPL基因的复制表达，HWAPL基因异常表达可能是HPV致宫颈癌发病机制的重要环节。