中药是中华民族灿烂文化宝库中的一大瑰宝，在我国已有几千年的应用历史，形成了丰富的理论与实践经验。中药现代化是我国的一项重大科技行动。这项科技行动的顺利实施，不仅将推动我国中药和整个现代医药产业的迅速发展，产生巨大的社会效益和经济效益，而且对于促进现代医学科学和生命科学的发展，也将产生不可估量的影响。中药现代化中的核心问题是中药的药效物质基础及中药作用原理(论文第一章)。 对于药用植物包括中药药用植物，药效物质基础即活性化合物研究的传统模式是选用一种植物经过系统分离、纯化得到单一化合物(从植物到分子)，然后对这些化合物进行活性鉴定；或采用生物活性指导下的跟踪分离、纯化。传统的方法费时、费力、周期长，不可能在短时间内对药用植物进行全面的研究。而采用亲和结合法，固定化生物靶点，利用化合物对靶点亲和力的差异，运用亲和前沿色谱一质谱技术，通过质谱的选择离子流图来分析数据，则可以从中药混合物中不需分离即确认出活性成分。由于质谱的高灵敏度和低检测限，可以针对中草药中的每一个组分(包括痕量成分)进行数据分析，从而非常有效地解决了中草药中各个组分之间含量差别大、有些活性成分含量低微的问题。亲和前沿色谱-质谱法可先从植物中筛选确认未知的活性化合物，然后再从植物中分离出该化合物。这种反向的从活性分子到植物分离的方法，可以集中资源，在较短时间内从中药体系中发现及提取活性分子。 本论文在固定化靶标方面，不仅将固定化蛋白亲和前沿色谱-质谱联用应用于HIV整合酶、抑瘤蛋白p53、胰岛素通路蛋白Rheb，还应用于α1-肾上腺素受体膜，用于从中草药中筛选与其有结合的活性化合物。针对各靶点，实验均找到了有结合的化合物，而且大多数活性已得到生物测活的初步确证。尤其是对抑瘤蛋白p53，不仅对其野生型，还对其R248w突变型进行了筛选。实验中发现的两个与野生型强结合的化合物已通过初步的细胞实验确证其活性。而筛选中还发现了对野生型和突变型有选择性的化合物，进一步的测活实验正在进行中。亲和筛选的具体内容见第二章。亲和前沿色谱.质谱法可以在短时间内寻找到针对一个靶点的活性化合物，如果把此方法用于多个相关靶点蛋白，筛选药理活性相关的多种中药植物，综合分析所得数据，对中药的多活性化合物多靶点多途径机理研究必将有所帮助。 亲和前沿色谱-质谱联用可以快速筛选出中药中的活性物质，但有些靶点蛋白是很难获得的，而且此种方法只适用于筛选，并不适于分离物质。即使确定了活性化合物，想要得到实物，往往还是要采用传统的分离提取方法，目前使用的常规分离材料(正相、反相或离子交换型)的选择性都不是很理想，致使分离效率较低，耗时较长。许多研究工作曾致力于提高分离材料的选择性。为分子量身定做模板，即分子烙印，是近年发展起来的能够制备出对目标分子具有特定识别能力的聚合物材料的一种技术。分子烙印聚合物又被称为模拟受体，对模板分子及其结构类似物有选择性的识别能力，可以选择性地分离目标产物。MIP制备简单，性质稳定，耐酸、碱、有机溶剂，可以重复多次使用，是一种很有发展前途的新型仿生材料。 论文第三章内容是分子烙印聚合物制备的新方法一“柱填充法”。“柱填充法”操作过程简述如下：耐高压、稳定性好的空心微珠被选择作为色谱填料，玻珠经硅烷化反应接上双键并干燥后，干法装入不锈钢色谱柱(50×4.6mmI.D.)。然后用注射器将一定量预聚合液注入色谱柱，预聚合液含模板、功能单体、交联剂、引发剂和致孔剂，其组成与本体法聚合液类似。通氮气除氧并使玻珠表面聚合液膜均匀。最后，用堵头封上色谱柱两端，置于反应温度聚合反应。聚合反应将主要在玻珠表面进行，反应完成后，色谱柱洗去模板分子后可直接使用。这种方法简单、快速，玻珠作为载体稳定且压力小，因为只需要预聚合液填充柱内玻珠间空隙，覆盖玻珠表面，所以不仅降低了模板用量，也减少了其它试剂的消耗。使用“柱填充法”合成了大黄素的分子烙印聚合物，获得的MIP烙印效率高、有较好的动力学性能，且柱压低。金丝桃素“柱填充法”聚合物的合成和亲和前沿色谱-质谱评价，为分子烙印聚合物用于亲和前沿色谱-质谱联用筛选提供了可能。 中药中活性化合物的寻找是很重要的，但仅有活性化合物是不够的，中药以它特有的方式起作用。论文第四章内容是中药中的聚团现象。60种常用中药饮片和24种中药复方在常规煎煮后，用动态光散射检测，均发现存在聚团。表明中药中的聚团现象普遍存在。心血管治疗的经典方血府逐瘀汤和精冠汤被用来做进一步的研究。血府逐瘀汤和精冠汤中的聚团不仅能够耐受胃肠道条件，而且能够通过Caco-2细胞，即通过肠吸收后聚团仍然存在。血府逐瘀汤和精冠汤对三个心血管靶标，纤溶酶原激活剂抑制剂-1(plasminogenactivatorinhibitorone，PAI-1)，血管紧张素转化酶(angiotensin-convertingenzyme，ACE)和诱导型NO合酶(induciblenitricoxidesynthase，iNOS)的活性也与聚团相关。 基于这些结果，提出一个假说：每种中药都既含有单一分子状态的化合物，又含有聚团，且聚团是多种多样的，化合物与聚团是中药特异性的；中药中的活性物质可能是以单分子状态存在，也可能是存在于聚团中，这取决于不同的靶点；聚团可能以两种方式与靶点作用，一种是非特异性的吸附作用，但是是与聚团本身相关的(即植物或复方相关)，另一种是聚团中的特异性作用物质在聚团接近靶点后从聚团中扩散出来并与靶点相互作用。聚团现象对于理解中药机理和基于中药的药物发现都将有所帮助。