PTEN在口腔鳞癌及癌前病变中作用及其机理的研究

被引量 : 0次 | 上传用户:xytw895
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
口腔鳞癌是最常见的口腔癌之一,其发病率高,生存率低,严重危害人类健康。口腔鳞癌是多基因变化的结果,抑癌基因的失活、缺失与肿瘤的发生密切相关,因而基因诊断和基因治疗日益得到人们重视。PTEN(phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome ten)基因是1997年发现的一种新的肿瘤抑制基因,定位于人染色体10 q23.3,是迄今为止发现的第一个具有磷酸酶活性的抑癌基因,它的异常表达见于各种恶性肿瘤。本研究应用免疫组化技术S-P法和Western-blot对10例正常口腔粘膜、10例上皮单纯增生、15例上皮异常增生和32例口腔鳞癌组织中PTEN的蛋白表达情况进行检测,并观察该基因表达情况与患者年龄、性别及组织分化程度的关系;采用基因工程方法获得的工程菌(带有含PTEN基因的质粒pcDNA-PTEN)及含有pcDNA3.1(+)空载体质粒的菌种接种于含相应抗性的液体培养基中过夜培养。采用碱裂解法提取质粒,经限制核酸内切酶酶解分析和PCR扩增鉴定后,用超纯质粒提取试剂盒提取无菌质粒,分别将PTEN的真核表达载体和空载体转染人舌鳞癌(Tca8113)细胞系,经G418药物筛选一周,未转质粒的对照组细胞全部死亡,转入质粒的细胞系中含有阳性细胞克隆,继续培养至一定量后,分别从mRNA水平和蛋白质水平检测到PTEN基因已成功转入Tca8113细胞系中并能在其中表达,观察转染前后细胞的生长情况对其进行细胞计数,并通过流式细胞仪检测PTEN基因转染后对细胞增殖和细胞凋亡的影响。结果:正常口腔粘膜和上皮单纯增生组织中PTEN蛋白全部<WP=44>阳性表达;上皮异常增生组织中PTEN蛋白阳性表达率为93.3%;OSCC组织中PTEN蛋白的阳性表达率为71.9%,其中高、中、低分化OSCC组织中PTEN蛋白的阳性表达率分别为85.7%、75%和33.3%。PTEN在OSCC组织中的蛋白表达与患者的性别、年龄无明显相关性,但与组织分化程度明显相关(P<0.05)。PCR和酶切鉴定结果表明构建的真核表达质粒pcDNA-PTEN正确可用于基因转染实验;细胞生长曲线及流式细胞仪检测显示转染PTEN基因后对肿瘤细胞生长有一定的抑制作用,并且促进细胞凋亡,细胞周期从G1期到S期发生抑制。结论:抑癌基因PTEN在口腔鳞癌发生发展过程中的表达呈进行性下调或缺失,在上皮异常增生组织中PTEN蛋白的阳性表达率较高,低分化鳞癌中PTEN蛋白的阴性表达率较高,因而借助PTEN可帮助鉴定口腔鳞癌的分化程度;体外PTEN基因的转入可以明显地抑制人舌鳞癌(Tca8113)细胞的生长,并促进细胞的凋亡,因而PTEN可能在口腔癌的基因诊断和基因治疗上发挥一定地作用。
其他文献
<正>找到恰当合适的内容桔子水晶星座微电影去年被网民和业内关注得比较多,其微博转发超百万次,视频数据总播放超5000次。如果非要说成功,应该归功于网民,他们是社交网络的主
期刊
本文在分析棚户区现状的基础上,阐述了棚户区改造的意义,提出棚户区改造规划内容和设计要素。通过对改造过程的合理规划、恰当设计、人为修改,不但提高棚户区改造的科学性和
法国著名社会学家鲍德里亚认为,当今社会从某种意义上说已成为消费社会。消费已经从物品消费转变为符号消费、图像消费。消费是一种操纵符号的行为,人们对符号的追求是无穷的
分析研究了模拟住宅书房中工作学习、接待客人和休息娱乐3种活动场景时的24种照明方案,对书房的各种活动所需的照度水平提出了具体的建议。此外,对工作学习活动场景中工作区域
本文以国内在研的新155毫米自行加榴炮扭杆式平衡机初始方案为研究对象,通过对扭杆式平衡机的工作原理和结构特点进行深入的分析,抓住影响扭杆式平衡机初始方案中出现的不平衡
进入二十一世纪,我国国民经济保持多年高速增长,人民生活水平不断提高,各行各业都在市场经济的带动下表现出勃勃生机,航空运输业也融入市场经济的大潮,航空公司、机场先后进入企业
<正>教师表扬学生,如果表扬讲究艺术,方法正确,就会收到事半功倍的效果,如果方法失当,就会失去表扬应有的价值。所以,为了提高表扬的效果,教师在表扬时要做到五忌。一、忌千
针对属性值为区间数的多属性决策问题给出了一种VIKOR方法,并通过供应商选择问题说明此方法是合理有效的.
<正>虽然马云个人在阿里巴巴总体股份中占比不高,但他拥有所有内部人的投票代表权,而这支创业队伍成为企业事实上的内部控制人,把马云个人7.4%的股票权限放大到51%以上。马云
随着微机电系统(MEMS)和微流体装置等微观领域对高质量塑料微焊接的需求日益增强,热塑性塑料激光透射微焊接逐渐成为人们研究的热点。近年来,国外已经开展了对热塑性塑料激光