本实验研究目的是探讨影响小鼠超数排卵的若干因素；建立良好的卵母细胞染色体制备技术，为随后的孤雌胚染色体制备提供参考；寻找小鼠卵母细胞孤雌激活的最佳条件；为促进孤雌胚体外发育选择适宜的培养体系，为下一步孤雌胚胎干细胞的提取工作奠定基础。　　 实验在保证其他条件一致的前提下，分别按不同研究对象(激素剂量、小鼠周龄、激素注射间隔时间、动情周期)将小鼠随机分为四大组，对其超排处理后，将雌鼠与雄鼠合笼，于合笼后数天，收集受精卵或桑椹胚，根据胚胎的色泽、卵裂球是否整齐、排列是否紧凑、透明带和细胞膜是否完整、胚胎发育阶段与回收时间是否相符等情况综合分析，确定其是否为可用胚，并对其计数，从而比较超排效果。采用渐进固定气干法，制备激素超排与体外成熟培养所获卵母细胞的染色体核型，并比较其非整倍体率。将最佳超排方案下所获卵母细胞，移入事先在培养箱中预平衡1h以上的活化滴或对照组培养滴中，于室温(乙醇)或培养箱内(SrCl2)进行活化处理，处理结束后，以M2液或无钙M2液洗涤三遍，移入CZB培养液滴(15-20个卵/50μL)中，封盖石蜡油，置于37℃、5％CO2、饱和湿度培养箱内培养至6h后，于倒置相差显微镜下观察卵母细胞活化情况，比较不同激活方案下所得卵母细胞的激活率。挑选出孤雌激活卵随机分为六组，分别置入CZB培养液(对照组)和事先建立好的兔原代(P0)及传代(P1、P2、P3、P4)输卵管上皮细胞(ROEC)共培养体系(实验组)，观察孤雌胚的体外发育情况，比较单一培养基与共培养体系对小鼠孤雌胚的体外培养效果。　　 实验结果显示：(1)7.5IU激素剂量组、6-8周龄组、激素注射间隔48h组、动情前期和间情期组超排处理后所得可用胚数显著高于相应的对照组；(2)激素超排与体外培养两组卵母细胞染色体的超单倍体率分别为2.5％、8.3％，亚单倍体率分别为17.5％、18.3％，修正后的非整倍体率分别为5.0％、16.7％，两组间各项指标无显著性差异(P＞0.05)；(3)18h卵龄小鼠经7％乙醇处理7min后所获卵母细胞激活率为89.1％，10.0mmol/LSrCl2处理6h与20.0mmol/LSrCl2处理1h两种方案处理所获激活率分别为89.0％、72.0％；(4)孤雌激活卵与P0、P1、P2、P3代ROEC共培养，与在CZB培养液中单独培养相比，培养发育至2-细胞及4-细胞的胚胎数无显著性差异(P＞0.05)，而共培养体系的桑椹胚形成率(57.9％、62.9％、58.3％、50.4％)显著高于CZB单独培养组(34.5％)，差异有统计学意义(P＜0.01)。　　 综上所述，(1)选取处于动情前期与间情期的6-8周龄小鼠，间隔48h分别给予7.5IU PMSG与7.5IU hCG，能获得最佳的超排效果；(2)本研究已掌握较稳定的卵母细胞染色体制备技术；(3)7％乙醇处理7min与10.0mmol/L SrCl2处理6h及20.0mmol/LSrCl2处理1h，均能获得较高的卵母细胞激活率；(4)输卵管上皮细胞共培养体系能明显提高小鼠孤雌胚的体外发育率。