泛素化途径需要泛素激活酶、结合酶和连接酶共同完成，底物蛋白质的特异识别主要由泛素连接酶(E3)完成。哺乳动物精子发生过程中存在大量的泛素化修饰以及其介导的降解，同时小鼠和人类基因组有大量E3编码基因。虽然小鼠和人的E3被陆续发现，然而系统分析精子发生相关E3的工作尚未见报道。　　本研究丰要通过mRNA表达芯片和UniGene数据库来预测小鼠和人基因组泛素连接酶数量并分析小鼠睾丸组织中E3的表达概况。基于预测结果，我们对部分E3的mRNA表达特异性，亚细胞定位和连接酶活性进行验证，并对一些感兴趣基因深入功能研究。　　我们从小鼠基因组中挖掘到398个E3编码基因，他们的产物含有经典的E3结构域RING，U-box和HECT。与人类基因组相比，E3编码基因在两物种间高度保守。我们发现有一群预测泛素连接酶显著富集于睾丸组织，这些酶在肝脏、肺脏和肌肉组织中含量很低或不表达。在73个富集蛋白中有32个在睾丸中特异表达。我们用RT-PCR验证了10个预测基因mRNA的组织特异性，结果证明所有选择基因都在睾丸中富集。此外我们鉴定了部分连接酶的亚细胞定位，具有跨膜结构域的E3s主要定位在细胞核周的胞质中。而没有跨膜区和信号肽的E3s弥散分布在整个细胞中。为了进一步证明预测准确性，我们通过体内和体外泛素化实验验证酶活，结果显示选取的E3s都具有酶活活性。　　基于本实验室前期针对RNF151的工作，我们希望通过构建睾丸RNF151敲除小鼠深入探讨它与BLOC-1复合物的关系以及其体内功能。　　综上所述，我们发现大量泛素连接酶在小鼠和人中高度保守并且参与精子发生。这些E3s中有一群在睾丸组织特异或高度表达。这些结果提示E3s可能在精子的形成中发挥重要作用。系统分析E3s对我们全面了解精子发生和寻找其中关键调控因子提供线索。Rnf151敲除小鼠模型为体内研究RNFI51的功能奠定实验基础。