Tbx3对ES细胞分化及端粒延长机制的初步探讨

来源 :南开大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:vensen_guo
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Tbx3基因是T-box(Tbx)基因家族的成员之一,这一家族属于发育调控相关转录因子基因家族,早期即在胚胎的肢芽边缘表达,参与细胞信号的传导,从而影响机体的发育和稳定,尤其在胚胎发育时期,对于四肢和乳腺的发育尤其重要。Tbx3和Tbx2还在机体的复制性衰老及肿瘤的发生中发挥作用。最近Nature一篇报道说在重编程多能干细胞时,加入Tbx3转录因子,可以提高获得嵌合体的效率,但是具体的机制并不清楚。推测可能有两种机制:一方面Tbx3通过提高ES细胞多能性而实现,因为有报道Tbx3可以在没有Lif因子存在的情况下,通过调控Nanog维持细胞的多能性,并且也有研究表明Nanog是生殖细胞形成及存活所必需的,所以可能的模式是Tbx3通过调控Nanog调控生殖系转移:另一方面Tbx3可能通过影响ES细胞的分化方向使其更容易向生殖细胞分化而实现,因为Tbx3对早期胚胎发育具有重要且广泛的调控作用,所以设计实验在ES细胞里过表达Tbx3,通过定量和免疫荧光检测过表达细胞系的多能性基因的表达情况,另外通过体内注射和体外分化实验验证我们的假设。结果显示过表达Tbx3后ES细胞的多能性基因并没有显著变化,体外EB分化和畸胎瘤注射也能向三胚层分化,但是当分化8天时,意外发现过表达Tbx3细胞系有极微弱或没有心肌跳动,并且继续分化11天时也没有出现,检测心肌marker(MHC,Myocardial,Nkx2.5)发现也没有表达或表达很低,这表明Tbx3可以影响ES细胞向心肌分化。同时也首次发现Tbx3可以引起端粒的延长,初步研究可能是通过端粒重组蛋白Zscan4而实现的。  
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