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目的：放射治疗的一个基本理论依据是肿瘤细胞和正常组织具有生物学差异,对放疗反应不同,即肿瘤组织对放疗更敏感,这也是放射治疗的基础。CDC25A的过表达常见于多种肿瘤组织中,因此CDC25A的含量可能决定放疗后细胞的命运,为探讨其具体效应及机制,分别建立高表达CDC25A和低表达CDC25A的肺癌细胞系H1299,观察CDC25A含量的高低对H1299周期、增殖及放射敏感性的影响,并初步探讨CDC25A影响放射敏感性的机制。方法：第一部分：通过脂质体转染pEGFP-N1-CDC25A-GFP质粒的肺癌细胞系为过表达CDC25A细胞组,转染pEGFP-N1-GFP质粒的为过表达CDC25A对照组,转染pGPU-GFP-shRNA质粒的为低表达CDC25A组,转染pGPU-GFP质粒的低表达CDC25A对照组,未行特殊处理的是空白对照组；五组细胞分别通过RT-PCR法和WB法检测五组细胞中CDC25A的mRNA和蛋白含量以鉴定转染效率。通过流式细胞仪及MTT法检测CDC25A对细胞周期及增殖的影响。第二部分：通过G418方法联合荧光显微镜筛选出过表达细胞株,低表达细胞株,并以正常细胞株为对照。4GyX线照射后16h时通过流式细胞仪检测三株细胞的细胞周期分布,4Gy和12Gy X线分别照射三株细胞后选取1d,4d,7d三个时间点通过MTT方法绘制细胞增殖曲线。通过克隆形成实验比较CDC25A含量的不同对三株细胞放射敏感性的影响。第三部分：通过WB方法检测过表达细胞株,低表达细胞株和正常细胞株放射线照射前后Ku70蛋白含量差异,通过荧光免疫共聚焦检测三株细胞放射线照射前后yH2AX含量的差异,以此初步探讨CDC25A影响细胞放射敏感性的机制。结果：第一部分：成功转染各种质粒,RT-PCR及WB方法检测结果显示过表达组CDC25A表达量最高,低表达组CDC25A表达量最低,而过表达对照组、低表达对照组和空白对照组三者无论是mRNA水平还是蛋白水平表达均无明显差异。转染质粒后12h、24h和72h时检测细胞周期均发现五组细胞间细胞周期分布并无差异。MTT结果显示过表达CDC25A组细胞增殖率最快(p<0.01),低表达CDC25A组增殖率最慢(P<0.01),其余三组无明显差异(P>0.05)。第二部分：G418成功筛选出CDC25A稳定高表达细胞株和低表达细胞株。经4Gy X线照射后16h时高表达细胞株细胞周期主要集中于G2/M期41.4±1.685%,较少处于G0/G1期37.5±1.579%,而低表达细胞株细胞周期较少处于G2/M期23.2±1.584%(P<0.01),明显阻滞于G0/G1期51.8±1.638%(P<0.01)。分别经4Gy和12Gy X线照射后低表达细胞株增殖率最快,而高表达细胞株细胞增殖率最慢(P<0.01),12Gy剂量组中三株细胞增殖差异更明显。克隆形成结果显示相较于正常细胞株,高表达细胞株经放射线照射后克隆形成率较低(P<0.01),而低表达细胞株的存活率高(P<0.01)。说明过表达CDC25A可增加肺癌细胞系的放射敏感性。第三部分：未经放射线处理的五组细胞过表达CDC25A组Ku70表达量最高、yH2AX含量最低,低表达CDC25A组Ku70表达量最低、yH2AX含量最高,其余三组无明显差异。经4Gy X放射线照射后24h时Ku70表达量仍旧在CDC25A过表达组最高,在CDC25A低表达组中最低。免疫荧光共聚焦结果显示2Gy X放射线照射1h后CDC25A高表达组中yH2AX含量最高,CDC25A低表达组中yH2AX含量最低。结论：1. CDC25A可加速细胞周期的进程并促进肺癌细胞增殖。CDC25A与肺癌细胞增殖率呈正相关,这可能与正向调控Ku70增加肺癌细胞损伤后修复能力以及减少DNA双链断裂相关。2. CDC25A可调控G1/S期和G2/M期关卡。过表达CDC25A可导致细胞经放射线照射后仍通过G0/G1、G1/S和S期,并进行有丝分裂。相反,低表达CDC25A可导致细胞经放射线照射后仍阻滞于G0/G1. DNA损伤时关卡阻滞功能的废除,低表达CDC25A可加强关卡的阻滞功能,从而阻止细胞周期的进程为DNA的损伤修复争取时间。3.过表达CDC25A可导致放射线照射后细胞增值率的下降,并增加肺癌细胞对放射线的敏感性。而低表达CDC25A具有相反的作用。研究发现放射线照射后1h时过表达CDC25A的细胞中yH2AX含量明显高于正常细胞,说明在相同时间内过表达CDC25A导致更多的DSB未能完成修复。这可能与过表达CDC25A可导致DNA损伤时关卡阻滞功能的废除,促使细胞在DNA损伤未进行修复的情况下仍进行有丝分裂有关。4. CDC25A可以作为放射增敏的靶基因或者作为预测肿瘤患者是否对放疗敏感的方法。