论文部分内容阅读
目的:观察捏脊法对颈椎病模型大鼠,在软骨细胞炎性反应方面及对p38MAPK信号转导通路的影响。方法:采用SD大鼠,共计40只,雌雄各半。每组10只,分假手术组、模型组、模型推拿组(简称推拿组)、莫比可组,总共4组。造模组参考颈椎间盘退变模型;假手术组仅是将皮肤切开,随后缝合,当作空白对照。完成制备模型,饲养3个月后进行甲苯胺蓝染色。造模成功的标准:大鼠椎间盘组织形态学结构发生改变。造模成功后,分成3组,每组各8只。分别是:模型对照组(简称模型组)、模型捏脊组(捏脊组)、模型莫比可组(简称莫比可组)。捏脊组:采用自制松紧带方法,进行安全固定。实验操作为:一手固定大鼠,另一手拇指指腹与食指指腹提起脊柱两侧皮肤,从尾根部到“大椎”捻动向前此为一次,重复交替进行,总操作14次。从第8次开始,采用双手拇指的桡侧缘顶住大鼠背部皮肤,示指与中指向前按,四指同时提捏起大鼠背部皮肤,从尾根部到“大椎”捻动向前为一次,采用捏三提一的方法。一天一次,一个疗程2周,间隔2天后,继续下面的疗程,共2个疗程。莫比可组:灌胃干预,莫比可片的量为0.7878mg/kg一天,时间上同捏脊组;模型组、假手术组:模型组与假手术组,不予治疗,余同捏脊组一致。疗程结束,使用甲苯胺蓝,对组织进行染色。采用免疫组织化学法,检测IL-6、IL-8的含量;采用Western Blot检测MKK3/6、p38MAPK表达水平。探讨捏脊法对软骨细胞炎性因子影响以及对p38MAPK信号通路的影响,提出捏脊法具有的抗炎效应,可能是介导p38MAPK信号通路实现。结果:(1)甲苯胺蓝染色:假手术组:软骨终板数目多、深蓝紫色、厚度厚并且细胞外基质丰富。造模组:软骨终板为厚度变薄、染色变淡、在数目及细胞外基质,都变少。(2)免疫组织化学检测:对比假手术组,在模型组中,IL-6、IL-8的阳性表达量,显著增多,差异含有统计学意义(P<0.05);比较模型组,在捏脊组与莫可比组中IL-6、IL-8的蛋白表达量,均呈现明显减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)WestemBlot检测:比较假手术组,在模型组中MKK3/6、p38MAPK蛋白阳性表达量明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,捏脊组、莫比可组MKK3/6、38MAPK蛋白表达量明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:(1)通过捏脊疗法能降低椎间盘软骨细胞中IL-6、IL-8蛋白表达量。(2)通过捏脊疗法能下调椎间盘软骨组织中MKK3/6、p38MAPK的的蛋白表达。(3)通过捏脊疗法能抑制软骨终板的炎性反应及椎间盘的退变。该机制可能是下调了 IL-6、IL-8阳性表达,原因可能是通过MKK3/6-p38MAPK信号转导通路的调控。