论文部分内容阅读
内生真菌普遍存在于各种陆生及水生植物中,在与宿主植物经过长期协同进化的过程中形成了一种互利共生关系。近些年的研究表明,植物内生菌不仅能够帮助植物抵御病原菌和取食者的伤害,还可以增强宿主植物对多种逆境如高温、干旱、盐害和重金属等胁迫的抗性,具有重要的研究和开发价值。本研究以5种新疆耐盐碱植物苦豆子、骆驼刺、碱蓬、芦苇的根部组织和胡杨的枝条为材料,采用组织块分离培养方法和形态学与分子生物学相结合的方法对5种耐盐碱植物内生真菌进行了分离鉴定和多样性分析,并且对分离得到的内生真菌菌株进行了促进作物耐盐菌种的筛选。得到的主要结果如下：1)由5种植物样本中分离得到274株内生真菌的纯培养物。并对其进行了形态学和分子生物学鉴定,最终将分离得到的内生真菌鉴定为38个分类单元,分别归属于3个亚门,6个纲,10个目,12个科,19个属,其中14个鉴定到种的水平,其他以rDNA-ITS序列分析为主要依据,19个鉴定到属的水平,5个鉴定到科的水平。2)四种盐碱地植物根部和胡杨枝条中内生真菌的多样性水平整体都不高,多样性指数：骆驼刺(1.76)>苦豆子(1.49)>碱蓬(1.48)>芦苇(0.41),胡杨枝条的多样性指数是1.40;苦豆子根部内生真菌的优势属为Fusarium;骆驼刺根部的优势属为Alternaria;碱蓬根部的优势属是Fusarium和Phoma;胡杨枝条中的优势属是Cladosporium;芦苇根部占据优势地位的是Pleosporales类真菌。3)筛选得到了4株在平皿共培养条件下可以稳定促进植物耐盐的内生真菌菌株,在200mM NaCl盐胁迫下,接种内生真菌KDZ-5、LTC-9、LTC-17、LTC-20的水稻苗在株高上比对照组平均提高了12.3%、17.8%、21.2%、25.3%；接种KDZ-5和LTC-9的水稻苗在鲜重和干重比对照分别增加了19.5%、11.1%和78.9%、15.3%。4)水培实验中,盐胁迫下,菌株KDZ-5、LTC-9均表现出了对小麦苗的促生作用：在100mM NaCl盐胁迫处理下,接种KDZ-5的小麦苗的鲜重和干重比未接种的处理分别增加了21.6%和13.0%；接种LTC-9的小麦苗的鲜重和干重比未接种的处理分别增加了16.7%和14.6%。5)盆栽实验中,盐胁迫下,菌株KDZ-5、LTC-9、LTC-20均表现出了对小麦苗的促生作用：在200mM NaCl盐胁迫处理下,接种KDZ-5小麦苗的鲜重和干重比未接种的处理分别增加了10.9%和12.5%；接种LTC-9小麦苗的鲜重和干重比未接种的处理分别增加了3.6%和8.2%。在250mM NaCl盐胁迫处理下,接种KDZ-5小麦苗的株高、根长、鲜重上比未接种的小麦苗分别增加了51.4%、10.2%、18.5%；接种LTC-9的小麦苗比未接种的小麦苗分别增加了41.6%、17.9%、10.0%；接种LTC-20的小麦苗比未接种的小麦苗分别增加了54.5%、14.6%、27.2%。6)对盐胁迫下小麦叶片中丙二醛(MDA)和脯氨酸的测定结果显示：在盐胁迫下,与未接种内生真菌的小麦苗相比,根部接种4种内生真菌的小麦叶片中MDA含量显著下降,脯氨酸的积累量显著上升。说明筛选得到的四株内生真菌KDZ-5、LTC-9、LTC-17、LTC-20可能是通过降低小麦苗膜脂过氧化损伤,减少渗透胁迫对植物的损害,从而提高了小麦对盐胁迫的抵御能力。