荧光共振能量转移在DNA检测中的应用研究

来源 :天津工业大学 | 被引量 : 14次 | 上传用户:zhumuray
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DNA序列的检测与疾病诊断、基因检测密切相关,已经成为研究的热点。随着纳米粒子在DNA传感器中的应用,许多光学方法采用纳米粒子用于检测,如:比色检测、荧光共振能量转移(FRET)、表面等离子体共振分析等。与传统的化学方法相比,荧光共振能量转移方法有更高的灵敏度和简便性。本文就是研究了一种新型的纳米荧光共振能量转移体系。本文以DNA修饰的16nm的纳米金粒子作为能量受体、DNA修饰的巯基丙酸包裹的CdTe量子点为能量供体构建荧光共振能量转移体系。通过选择合适粒径的纳米金粒子和CdTe量子点,考察了纳米金粒子的吸收光谱与CdTe量子点的发射光谱的重叠重度,发现大于95%的光谱重叠可以促进荧光共振能量转移的发生。采用荧光光谱对探针进行表征,探针的荧光强度较弱,加入目标DNA后,探针的双链被打开,CdTe纳米粒子和纳米金粒子的距离变大,CdTe发出的荧光不能被纳米金粒子吸收,荧光强度变大。考察了DNA链长、供受体比例、pH值、放置时间以及不同量目标对探针体系的影响,得出探针合成的最优条件:DNA链长相隔6个碱基、CdTe/Au=1∶5、pH值为7.0、放置时间为2h。计算出探针的淬灭效率为74.6%,FRET半径为4.07nm,供受体间的距离为3.41nm。利用此荧光共振能量转移体系,根据荧光恢复强度的差别,对DNA单碱基错配进行了成功检测。
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