目的:探讨研究抗感染治疗及抗感染联合免疫调节治疗对脓毒症大鼠肠道微生态的影响,揭示抗感染治疗及抗感染联合免疫调节治疗脓毒症的疗效机理,以及对脓毒症大鼠肠道微生态影响的机制,为阐明脓毒症的发生发展机制提供理论依据,为探索脓毒症诊断和治疗方案的优化奠定基础。方法:随机将66只150-250 g SD雄性大鼠分成5组(假手术组,脓毒症组,环磷酰胺组,亚胺培南组,亚胺培南联合环磷酰胺组)。采用盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture[CLP])复制脓毒症模型,假手术组大鼠进行同样的手术操作,但不进行穿孔及结扎。另随机选取50只大鼠给予同样的造模方式及分组(每组10只大鼠),进行各组大鼠生存分析研究。判断和鉴定脓毒症模型复制成功后,通过腹腔注射亚胺培南(120 mg/kg)及环磷酰胺(10 mg/kg)给予干预治疗,每隔12小时给予一次药物治疗;生存分析动物连续给予干预治疗7日,记录各组大鼠生存时间及数量并绘制7天生存曲线,定量分析各组生存数据;肠道屏障功能分析及机制探讨,选取给予治疗后24小时时间节点。通过荧光示踪法检测各组大鼠血清中FD-70浓度,定量分析各组大鼠肠道通透性。通过HE组织切片,观察各组大鼠肠道组织损伤,以及TUNEL法,定性分析各组大鼠肠道黏膜细胞凋亡,进一步探讨分析各组大鼠肠道跨细胞通透性水平。通过蛋白印迹技术(Western-blot技术),检测各组大鼠肠道紧密连接蛋白(occludin)表达水平,探讨分析各组大鼠细胞间通透性改变。通过酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay[ELISA])法检测各组大鼠血清细胞因子(interleukin[IL]-6,IL-10,tumor necrosis factor[TNF]-α)表达水平,分析细胞因子对各组大鼠肠道通透性的影响。结果:(1)成功复制脓毒症模型,脓毒症大鼠7天生存率为18.18%。亚胺培南组脓毒症大鼠生存率明显提高(50%vs 18.18%),而联合治疗组脓毒症大鼠生存率进一步改善(70%vs 50%)。(2)通过检测血浆中FD-70表达量定量分析肠道通透性的改变,脓毒症大鼠肠道通透性明显增强,亚胺培南治疗组及联合治疗组脓毒症大鼠通透性明显改善,而亚胺培南组与联合治疗组相比,联合治疗组脓毒症大鼠肠道通透性高于亚胺培南组。(3)进一步探讨联合治疗组脓毒症大鼠肠道通透性增加的可能机制,采用HE组织切片定性检测各组大鼠肠道组织的病理损伤,以及TUNEL法定性检测各组大鼠肠道黏膜细胞凋亡分析肠道跨细胞通透性。结果显示,脓毒症大鼠出现明显的肠道组织损伤及细胞凋亡,亚胺培南组及联合治疗组脓毒症大鼠肠道组织损伤及凋亡明显改善,亚胺培南组与联合治疗治疗组相比,脓毒症大鼠肠道组织病理损伤及肠道细胞凋亡未见明显差别。(4)定量检测了肠道紧密连接蛋白(occludin)表达水平用于进一步探讨分析不同治疗方式对各组大鼠细胞旁通透性的影响。结果显示,脓毒症大鼠肠道组织occludin蛋白表达减少,亚胺培南及联合治疗组脓毒症大鼠肠道组织occludin表达量增加,而联合治疗组脓毒症大鼠肠道组织occludin蛋白表达量明显低于亚胺培南治疗组。(5)进一步探讨细胞因子对各组大鼠肠道通透性的影响。结果显示脓毒症大鼠血清IL-6,IL-10,TNF-α表达水平均是明显增强,亚胺培南组脓毒症大鼠血清IL-6,IL-10,TNF-α表达水平均是明显减弱,而联合治疗组脓毒症大鼠血清IL-6,IL-10表达水平进一步减弱,而TNF-α表达增强。结论:(1)亚胺培南治疗可改善脓毒症大鼠的生存率;亚胺培南联合小剂量环磷酰胺治疗,可明显提高脓毒症大鼠生存率。(2)亚胺培南治疗对脓毒症大鼠肠道黏膜屏障损伤有保护作用。亚胺培南联合小剂量环磷酰胺治疗,可加重脓毒症大鼠肠道黏膜屏障功能障碍,其可能机制是IL-10因子及occludin蛋白表达减弱。