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肿瘤的生长要求持续的血管新生来提供养分，抑制肿瘤血管新生疗法可以控制肿瘤生长和转移，目前受到广泛瞩目。相对抗肿瘤血管新生的蛋白疗法需重复给药和费用高昂的缺点，基因治疗可以长期、稳定、廉价地表达外源抗血管新生蛋白达到异曲同工的效果。但是目前抗肿瘤血管新生的研究基本都局限于肿瘤细胞本身，缺乏对肿瘤微血管和微循环的观察。因此，本研究通过小鼠内皮抑制素(Endostatin，ES)基因治疗来研究抗肿瘤血管新生疗法对肿瘤生长、转移的抑制作用，以及对肿瘤微循环功能的影响。实验包括下列内容： 1．以昆明小鼠肝脏总RNA为模板，经RT-PCR克隆获得了ES cDNA并测序实证，构建pSecTag2-ES(ES)、pSecTag2-ES-TT(ES-TT，TT源自tumor neovasculature-targeting peptide)真核表达重组质粒，转染COS-7细胞均获融合蛋白表达，该转染细胞上清可以诱导内皮细胞凋亡、抑制内皮细胞增殖；其中，ES组抑制内皮细胞增殖的作用强于ES-TT组(p＜0.05)。 2．在9日龄鸡胚尿囊膜血管新生实验中，pSecTag2-ES与甲基纤维素联合作用于鸡胚尿囊膜新生血管网72小时，可以抑制微血管网络的形成。 3．将荷Lewis癌的C57小鼠肌肉注射质粒DNA或DNA／PVP40偶联物，ELISA检测到ES／PVP40组C57小鼠血清中融合蛋白的表达，在ES／PVP40组和ES-TT／PVP40组肿瘤组织中融合蛋白浓度无统计学差异。肿瘤组织切片电镜检查和组织学检查可见ES／PVP40组和ES-TT／PVP40组中肿瘤细胞的凋亡和坏死，红染新生血管减少，但各组肿瘤细胞增殖未见差异。肺组织HE染色仅在空白对照组和空载体对照组中可见肺转移。质粒DNA与PVP40偶联后，对肿瘤生长的抑制效率均明显提高。ES与ES-TT融合蛋白的表达可抑制肿瘤生长和肺转移的发生，但前者的生物学作用强于后者。 4．鉴于金黄地鼠颊囊肿瘤模型在肿瘤微循环研究中具有微血管丰富、结构清晰、利于进行微循环动态连续观察的独特优势，本实验研究了ES基因治疗对金黄地鼠颊囊B16BL／6肿瘤生长和微循环功能的影响。空白对照组和空载体对照组中，B16BL／6细胞植入颊囊组织后引起肿瘤微血管明显增