代代花中三种单体化合物的活性研究

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代代(Citrus aurantium L. var. amara Engl)系芸香科(Rutaceae)柑橘属(Citrus)酸橙(Citrus aurantium L.)的变种之一。其含有同枳壳、枳实相似的化学成分及药理作用,其果具有消食、化痰和健胃疗效。代代花中含有丰富的挥发油,黄酮,柠檬苦素,甾体和噻吩类等。但是有关代代花化学成分和药理作用的研究报道很少,因此对代代花中提取出来的β谷甾醇(βS)、5羟基6,7,3’,4’四甲氧基黄酮(HTF)和Limonexic acid(LA)化学成分的活性进行研究,为其在更多领域应用提供一定的理论依据,有利于其资源的进一步开发利用。分别测定三种单体化合物的还原能力,清除自由基能力,抗卵黄脂蛋白脂质(LPO)氧化能力和抗PC12细胞损伤能力来研究其抗氧化能力,其中HTF和LA对双氧水刺激的PC12细胞损伤导致的细胞存活率和总的抗氧化酶(TSOD)活性下降和丙二醛(MDA)水平的升高有很好的抑制作用,特别是当浓度达到100 g/mL时HTF对SOD活性降低的抑制率可以达到65.1%,而LA对其的抑制率达到86.05%。为进一步的抗肿瘤抗癌和抗炎研究奠定了基础。研究了三种单体化合物的抗肿瘤细胞和癌细胞增殖凋亡活性,当浓度达到100 g/mL时HTF对B16细胞的抑制率可以达到73.0%,明显好于阳性对照五氟尿嘧啶(5 F)的抗肿瘤效果,LA对肿瘤细胞的作用仅次于5 F。β谷甾醇(βS)当浓度达到200 g/mL时对Hela细胞的增殖抑制率达到36.4%。在浓度为200 g/mL时HTF对肝癌细胞SMMC 7721增值抑制率达到88.2%,5 F、LA和βS分别为58.6%、50.3%和34.2%。HTF和LA能够明显的抑制CCl4所致HL 7702细胞损伤的谷草转氨酶(GOT)、MDA和脂肪脱氢酶(LDH)的增加,并且随着浓度的增加抑制效果明显增强,且随着浓度的增加抑制效果增强,其中HTF的作用效果好于Vc对细胞损伤模型的保护作用。对三种单体的抗炎、抗病毒和抗菌活性进行了研究,其中HTF和LA对脂多糖刺激的小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7)炎症因子NO浓度的增加有明显的抑制作用,并且能够明显的抑制2.2.15细胞产生的HBsAg和HBeAg,而βS基本没有抗炎和抗病毒活性。另外,在抗菌实验研究中,三种单体化合物都没有明显的抗菌效果。
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