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目的目前对于肝癌的治疗手段较多，然而整体看来，效果并不理想，肝癌患者的生存率较低的现状并没有在根本上的得到很大的改观，因此，在手术治疗的同时如何探寻更为有效的药物具有重要意义，本实验将二甲双胍、奥沙利铂、以及二者联合的情况下分别作用于肝癌BEL-7402细胞，并设定相应的观察对照组，通过运用不同的方法和指标来观察药物对细胞的作用,以评价药物对肝癌细胞的影响作用，以及二者之间是否具有协同作用，从而为临床用药提供基础研究方法在体外培养BEL-7402细胞，并将细胞分为4组，分别为空白对照组，二甲双胍组、奥沙利铂组、二甲双胍联合奥沙利铂组。本次试验对象均为对数生长期的细胞。首先，观察经过药物作用后，细胞增殖情况如何（MTT法测定）；其次，在电镜下观察上述药物作用细胞后，细胞形态上发生何种变化以及超微结构的改变情况；第三，观察药物作用以后细胞凋亡的变化（流式细胞技术）；最后，观察药物在作用于肝癌BEL-7402细胞后caspase-3、caspase-9以及促凋亡蛋白Bax表达和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达情况(Western Blot技术)。结果1.BEL-7402细胞在二甲双胍、奥沙利铂单用以及联合应用的情况下其生长及增殖均受到了抑制。在单用其中任何一种药物的情况下，抑制效果的强弱随着时间的增加也更加明显，其差异有显著性(P<0.05)；并且二者联合用药,与单独用药相比，其生长速度以及增殖抑制率明显增加，并且抑制率有显著性差异(P<0.05)。2.电镜观察发现二甲双胍及奥沙利铂作用于BEL-7402细胞后，细胞贴壁能力下降，细胞体积缩小，变圆，胞浆浓缩，核固缩，细胞漂浮于培养液中，呈现凋亡早期的形态学改变。3.流式细胞结果显示:经药物处理48h后，流式细胞结果显示,二甲双胍组与奥沙利铂组凋亡率分别17.63±1.12%和20.13±0.86；较空白对照组（13.15±0.65）差异有统计学意义（P<0.05)，联合用药组的细胞凋亡率为27.42±1.05%；与单独用药相比，差距有统计学意义（P<0.05)。4.Western Blot技术检测发现，在药物二甲双胍和奥沙利铂的作用下，caspase-3、caspase-9的表达明显升高,在二者联合用药的情况下，效果更明显。在药物作用下促凋亡蛋白Bax表达明显升高，而抗凋亡蛋白Bcl-2的表达在单药及联合用药情况下均无明显变化。结论1.二甲双胍和奥沙利铂单用或者联合应用均可以对人肝癌细胞BEL-7402的生长增殖产生抑制作用，并且可以促进其凋亡。2.二甲双胍和奥沙利铂联合用药时作用与单药组相比效果更明显，并且随着时间的增加，影响效果逐渐增强。3.二甲双胍及奥沙利铂对于肝癌细胞的凋亡作用可能通过Caspase级联反应实现，并且可能与促凋亡蛋白Bax的增加有关。