基于HSPs响应的氮胁迫下秀丽隐杆线虫的毒理效应

来源 :东北师范大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:csliu08
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由氮素化肥引发的面源污染等环境问题日益凸现,研究过量氮肥对机体可能引起的损伤具有重要意义。本论文研究了两种氮素化肥(硝酸钠和氯化铵)对模式生物秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans,简称秀丽线虫)的24h毒理效应和应激蛋白(HSPs)响应,氮素化肥设置四个不同浓度(0、1/100LC50、1/10LC50、LC50),并改变pH值对其进行复合胁迫探讨其生态毒理效应,从生理水平和分子水平探究硝酸钠和氯化铵对秀丽线虫的毒性作用。在生理水平上检测了秀丽线虫的存活率、头部摆动频率和繁殖率三个指标。在分子水平上,探讨了hsp90、hsp70和hsp12.2三种缺失型突变体对氮胁迫的响应,并检测了各方式胁迫下这三种应激蛋白的差异表达。研究结果表明,在生理水平上,秀丽线虫暴露于不同硝酸盐浓度(0-23g/L)和铵浓度(0-15g/L)时,其种群活性的变化随着暴露的氮浓度的增加而下降,四种类型株的秀丽线虫的存活率、头摆率也会随着氮浓度的增加而降低,并且氮胁迫还会导致线虫的繁育受到抑制,这证明过量的氮肥会对机体引起损伤,并且可能产生直接的毒害作用。在酸性条件下,硝酸钠溶液对野生型秀丽隐杆线虫(N2)的存活率、头摆率和繁殖率均产生影响,且随着pH值的降低其存活率、头摆率和繁殖率均有所下降。在碱性条件下硝酸钠溶液对野生型秀丽隐杆线虫(N2)的存活率、头摆率和繁殖率均会产生影响,但这种影响却与预期的结果并不一致,当pH值为9.0时,野生型秀丽线虫(N2)的存活率和头摆率显著高于pH值为8.0时。在酸性条件下氯化铵溶液的胁迫下对野生型秀丽隐杆线虫(N2)的存活率、头摆率和繁殖率随着pH值的降低而降低,呈现很好的相关性。在分子水平上,与对照相比,N胁迫下HSP12.2蛋白表达量无明显变化,HSP90和HSP70在氮胁迫下具有特异表现。经过实验,我们筛选出了各类胁迫下的敏感型和耐受型线虫的hsps突变体,氮肥胁迫下hsp90缺失型秀丽线虫(JT6130)表现出了较强的耐受性,而hsp70缺失型秀丽线虫(BC10067)对于氮肥的胁迫较为敏感,氮污染对HSP70有诱导作用,所以可以通过测量动物体内HSP70水平来监测环境污染。在氮肥胁迫下秀丽线虫的表现与HSPs蛋白表达相关性良好,说明秀丽隐杆线虫具有成为氮肥农业污染及氮沉降污染生物标志物的可能。
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