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肿瘤是一个包含有肿瘤细胞、浸润的免疫细胞与间质细胞,以及微环境中一系列分子组成的生态系统。在肿瘤微环境中,浸润的免疫细胞是肿瘤发生发展的重要因素之一。效应T细胞、调节性T细胞、无能T细胞、耗竭性T细胞、巨噬细胞、粒细胞和髓系来源抑制细胞(MDSC)等免疫细胞的浸润在肿瘤微环境中发挥不同的作用,影响着肿瘤进展的全过程。近年对肿瘤微环境和肿瘤免疫逃逸机制的深入研究发现,一组介导免疫调节的重要负性共刺激分子——免疫卡控点(immune checkpoints),如负性B7家族分子、CTLA-4和TIM-3等,异常表达在一系列肿瘤组织和/或浸润的免疫细胞,参与肿瘤免疫逃逸,并与肿瘤临床病理和预后密切相关,是构成肿瘤微环境的重要成分。TIM-3, T细胞免疫球蛋白粘蛋白分子(T cell immunoglobulin-andmucin-domain-containing molecules,TIM)家族的一员,主要表达在分化成熟的Th1细胞,细胞毒性CD8+T细胞、单核细胞、树突状细胞等,也被认为是应答性CD8+T细胞耗竭/功能障碍的重要标志性分子之一,而其在肿瘤免疫中的作用则正越来越受到关注。肿瘤发展的不同阶段,肿瘤微环境浸润的T淋巴细胞亚群和抑制性免疫细胞(如MDSC)借助其表达的负性共刺激分子/免疫卡控点介导抗肿瘤的免疫应答和肿瘤免疫逃逸。深入探讨负性共刺激分子TIM-3在肿瘤浸润T淋巴细胞(TIL)和髓系来源抑制细胞(MDSC)的表达特征、与临床的相关性及其参与肿瘤免疫逃逸的机制可为以干预TIM-3信号为基础的肿瘤免疫治疗提供新的理论基础和靶点。【目的】探讨负性共刺激分子TIM-3在人非小细胞肺癌T细胞和髓系来源抑制细胞(MDSC)上的表达及其临床意义。【方法】收集51例手术切除的诊断明确的非小细胞肺癌(NSCLC)病人癌组织及癌旁组织,采用消化液消化和机械研磨的方法获取单细胞悬液,经淋巴细胞分层液分离,经免疫荧光标记和流式细胞仪分析检测TIM-3在肿瘤浸润T淋巴细胞和MDSC的表达。同时采集同一患者和健康志愿者外周血,进行免疫荧光标记并溶血,经流式细胞仪分析检测TIM-3在外周血T淋巴细胞和MDSC的表达。分析TIM-3在非小细胞肺癌患者T细胞的表达与患者临床病理因素之间的相关性。【结果】(1)与癌旁正常组织浸润淋巴细胞和外周血T细胞相比,非小细胞肺癌患者肿瘤组织浸润淋巴细胞(TILs)表面TIM-3的表达明显上调;(2)统计学分析显示,TIM-3分子在NSCLC患者肿瘤组织浸润CD4+T淋巴细胞的表达与淋巴结转移及患者分期有关;(3)与健康对照组相比,非小细胞肺癌患者外周血MDSC高表达负性共刺激分子TIM-3;与癌旁组织相比,TIM-3在同一患者肿瘤组织的表达也明显上调。【结论】TIM-3在非小细胞肺癌患者肿瘤浸润CD4+和CD8+T淋巴细胞上有较高的表达,并且其在非小细胞肺癌肿瘤浸润CD4+T细胞的表达与肿瘤的淋巴结转移及患者分期有关。非小细胞肺癌患者外周血和肿瘤组织MDSC也表达负性共刺激分子TIM-3。所获结果为进一步探讨TIM-3分子在肿瘤微环境中的负性调控作用提供了新的思路和机制。