目前,我国的土地盐碱化已经日趋严重,已经成为了一个全球性的问题。在这些盐碱地区仅有少数几种植物生长。因此,我们面临的一个炙手可热的问题就是如何改善盐碱土从而降低盐碱地的面积。随着现在分子生物技术和基因工程的研究和日趋完善,有很多的研究已经把耐盐和耐旱的基因成功到克隆到植物体内,开辟了选择植物品种的又一个新的途径。红花(Carthamus tinctorius L.)为菊科(Compositae)红花属一年生的草本植物。埃及,巴基斯坦,印度等地区都有种植,从汉代引入到我国已有二千一百年的历史。红花不仅作为油药两用的作物,还可作为天然的食用色素。在我国主产于新疆地区,具有耐盐耐旱的特点。ScVP基因是由碱蓬分离出的液泡膜H+-PPase基因。H+-PPase (pyrophosphatase, PPase)即为焦磷酸酶,它是一种以焦磷酸为底物的水解酶。H+-PPase作为质子泵将细胞质中的H+泵入到细胞中,这样不仅可以使细胞的离子平衡和渗透平衡,还能减轻无机离子对细胞质的毒害。曾有人做了有关耐盐碱的实验,通过对转入了碱蓬H+-PPase基因的苜蓿进行分子生物学检测,发现了超表达ScVP转基因苜蓿的耐盐性和耐旱性都有着明显的升高。利用农杆菌介导外源基因的转化技术已经取得了显著的进展,迄今为止,已经有二百多种转基因植物是通过这种转化技术产生的。1.本实验是通过根瘤农杆菌介导法,用含有ScVP基因的农杆菌转化红花,最终得到含有耐高pH盐碱的转基因新品系红花植株。2.红花再生芽在含有植物生长激素6-BA的伸长培养基上进行优化,选择含有0mg/L,0.5mg/L,1.0mg/L,1.5mg/L,2.0mg/L,2.5mg/L的植物生长激素的6-BA。最终确定1.0mg/L的6-BA浓度为最适合红花再生芽生长的激素条件。3.用农杆菌介导法转化红花,并在含有1.5mg/L的Basta的培养基上筛选阳性苗。4.通过分子生物学检测,即PCR, Southern杂交结果分析,证实了ScVP基因已整合到红花基因组中,并有所表达。