论文部分内容阅读
普洱茶为山茶科(Theaceae)山茶属(Camellia L.)的1个种CamelliaSinensis var.assamica。是一种茶多酚含量较高的优质茶种。
根据茶叶的生产工艺不同,市场上的普洱茶分为经晒青后的生茶和经发酵处理的熟茶两种。根据已有的研究结果表明,茶中的茶多酚具有抗氧化和抗癌等较多保健功效。普洱茶化学组成会因茶叶的种植环境和加工工艺不同引起变化,从化学组成的变化,建立对普洱茶的整体质量评价是评价普洱茶品质的一个有效手段。
建立高精度和高重现性的普洱茶指纹图谱分析方法,色谱分离条件的优化是非常重要的。实验过程中的所有的茶叶样品都经研碎后称取约0.1克,用50%甲醇溶液超声提取40分钟,取0.5ml提取液用0.45μm膜过滤。优化的色谱条件是:色谱柱为Lichrospher C18(4.6x250mm,5μm);流动相为A:水-乙酸(100:0.01),C:乙腈-乙酸(100:0.01),梯度洗脱;流速1.0ml/min;检测波长210nm;柱温40℃;进样量2μl。
基于建立的指纹图谱,确立了21个特征共有色谱指纹峰。利用AgilentLC/MSD TOF,并结合儿茶素标准品和相关文献,对这21个共有峰进行了定性分析,确定了19个化学成分;通过相似度计算,对云南不同产地的普洱茶的指纹图谱进行比较分析;并将不同与大叶茶生茶的差异进行了分析。该方法可用于普洱茶的质量分析和评估。
同时,在相同的色谱条件下,采用外标法和标准加入法分别对不同产地的大叶茶样品中的EC、EGC、EGCG、ECG和Caffeine进行含量测定,在线性范围内,各儿茶素组分和咖啡因的峰面积与其相应浓度呈现良好的线性相关,r>0.998;样品的加标回收实验结果显示,各组分儿茶素及咖啡因的平均回收率均在95%0-120%之间,相对标准偏差<3%,重现性的变异系数为1%。
此外,利用Agilent LC/ESI MSD TOF建立了快速测定茶多酚含量的分析方法,首先以质谱峰的强度和质谱峰的分辨率为基准,对仪器参数进行了优化选择,包括Capillary,Drying gas,Fragmentor,Gas Temp,Nebulizer,OCT RF等,然后在质谱条件参数的优化条件下,分别对混合标准溶液和样品溶液进行了重现性考察,得出四种儿茶素的测定方法的线性范围分别为EC 0.04~2.1,EGC0.04~2.2,ECG 0.04~5.6,ECGC 0.05~10.6.μg/ml,RSD均小于10%。该方法能在2分钟内完成一个样品的测定。该方法可用于普洱茶中茶多酚的溶解动力学和化学反应动力学的研究。