草本刺嫩芽根多糖的分离、纯化及抗氧化性研究

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鉴于多糖的生物活性的多样化,并且对于人体无毒副作用,是一种具有巨大开发潜力的新型的保健物质,所以从天然植物中提取多糖成为当今保健品研发的热点。基于多糖的药用保健功能,本文从草本刺嫩芽根提取出了水溶性多糖并对其理化性质,抗氧化活性进行了研究。 1.采用单因素及正交试验对多糖提取工艺进行了优化,试验结果表明:当料液比1∶20、提取时间2h、提取次数2次、温度100℃时,多糖得率为15.32%。 2.在试验过程中,发现多糖提取纯化的过程中去除多糖液中的蛋白质是较为重要的环节之一,因此本文主要对于多糖提取中脱蛋白的工艺进行了深入的研究。目前,脱蛋白的方法很多,但都不是很理想,本文采用三氯乙酸法(TCA)、Sevage法、蛋白质等电点法作为单因素进行了试验,并在此基础上进行了正交试验,结果表明:TCA浓度为9%,Sevage法萃取次数为7次,pH值为8时为最优。 3.采用苯酚-硫酸法对草本刺嫩芽根多糖进行了测定,测得多糖含量为13.3%4.经DEAE-纤维素柱层析,得到了五种组分,分别为AKSP1、AKSP2、AKSP3、AKSP4、AKSP5,本文只对AKSP2进行了研究。 5.对AKSP2进行了理化性质研究,经紫外光谱扫描,结果显示在260和280nm处无明显吸收峰.表明不含核酸和蛋白质等杂质成分。将AKSP2进行了水解,经TLC分析表明其单糖组成为木糖、果糖、甘露糖、葡萄糖;将AKSP2水解物,进一步经HPLC分析表明其单糖确实为木糖、果糖、甘露糖、葡萄糖组成,摩尔比值为1∶1.05∶0.89∶1.32;对AKSP2在400~4000cm-1范围内摄得红外光谱,AKSP2确实是糖类化合物,其中可能含有乙酰基和甘露糖,并表明其为呋喃糖苷,其键型为β-型糖苷键。 6.对草本刺嫩芽根多糖进行了生物活性研究,该多糖能够提高小鼠的SOD、CAT,并能降低MDA含量,但是低剂量(100mg/kg.d)时不明显,只有在高剂量(200mg/kg.d)时,才表现出效果。通过试验看出高剂量草本龙芽根多糖可以提高小鼠肝脏与血清中的SOD、CAT,同时能够防止脂膜的过氧化,说明草本龙芽根多糖对衰老有一定的预防作用。
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