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研究背景:便秘是临床上常见疾病,同时也是多种疾病常见症状之一。相关资料显示,便秘有较高的发病率,并且随着年龄的增长,呈现递增趋势,更重要的是便秘给老年人带来的严重危害,常常导致心绞痛、心肌梗死、脑出血等。治疗上西医用药繁杂,并且容易造成耐药性,停药后易复发,手术治疗并发症多,费用高,水疗、生物反馈等新技术的疗效不确定。而中医在治疗便秘方面讲究从整体出发,辨证论治,对症治疗,具有毒副作用小,成本低,风险小,不易产生药物的依赖性等优势。但是,临床上中医治疗便秘的多样性和灵活性,使得其推广性和操作性差。因此,寻找一种辨证统一、治疗简便的方法成为亟待解决的问题。相关临床研究表明,阳虚便秘和阴虚便秘是便秘的两大类型,常用方药为麻子仁丸和济川煎。在基础研究方面,大多学者认为便秘与结肠动力不足有关,近年来内脏敏感性成为研究的热点。大量的研究发现肠易激综合征与内脏敏感性有一定的关系,但是结肠STC与内脏敏感性的研究较少,两者之间是否存在关系是一个值得研究的问题。因此,本文通过采用大黄灌胃的方法,建立阴虚证和阳虚证便秘模型,并运用中药方剂麻子仁丸和济川煎对其进行验证,比较阴虚证和阳虚证便秘模型之间是否存在差异以及从多角度探讨便秘的发生机制。研究目的:(1)文献部分:通过统计学方法分析近十年中医治疗STC的常用药物,探讨中药复方治疗STC的用药规律,寻找治疗便秘的最佳方药,对临床用药具有良好的指导意义。(2)实验部分:通过分析不同组别,即正常组、STC基础模型组(以下简称大黄组)、STC叠加阴虚组(以下简称阴虚组)、STC叠加阳虚组(以下简称阳虚组)、STC叠加阴虚+麻子仁丸(以下简称麻子仁丸组)、STC叠加阳虚+济川煎组(以下简称济川煎组)的大便特点、胃肠通过时间、结肠疼痛阈值、5-HT转运体、c-kit基因和病理切片特点,分析STC的发生与内脏敏感性、c-kit基因、5-HT转运体的关系,比较阴虚证与阳虚证的差异以及探讨麻子仁丸和济川煎改善便秘状况的作用机制。研究方法:(1)文献部分:①资料来源与筛选首先,应用CNKI网络,检索2002-2012年临床上所用治疗便秘的相关文献。其次,对文献进行筛选,确定入选文献。最后,规范中药术语。②统计学方法将最终符合要求的文献采用Excel建立数据库,应用SPSS18.0软件再次建立数据库进行频数统计和均数分析,运用系统聚类法对药物之间的关系进行研究。(2)实验部分:①STC动物模型的制备选取健康的雄性SD大共60只,通过随机分组分为正常组(n=10)和STC基础模型组(n=50)。首先,通过采用大黄灌胃的方法制备STC大鼠基础模型,正常组给予等量的自来水。其次,造模成功后分别叠加造模为STC叠加阴虚和STC叠加阳虚两组,其中,阳虚便秘模型和阴虚便秘模型分别采用氢化可的松和甲状腺素造模。②药物干预造模成功后,麻子仁丸组和济川煎组常规灌胃给药,正常组、大黄组、阳虚组和阴虚组灌胃等量的自来水。③指标检测实验结束后,测定粪便干湿比重及胃肠道通过时间,判断胃肠运动功能;测定疼痛感觉阈值,判断结肠内脏感觉功能;采用RT-PCR技术检测结肠组织c-kit、5-HT转运体的mRNA表达水平,探讨该模型结肠内脏感觉运动功能异常与结肠组织肠神经系统-Cajal间质细胞-平滑肌网络相关基因转录水平的表达;采用HE染色技术观察病理切片的变化特征。研究结果:(1)文献研究共获得治疗便秘的方剂134首,经统计分析和中药重组后发现麻子仁丸和济川煎是治疗便秘的常用方剂且疗效可靠。(2)济川煎、麻子仁丸与阳虚组和阴虚组相比,其结肠疼痛阈值降低(P〈0.05),阴虚组、阳虚组与正常组相比疼痛阈值升高(P〈0.05),而正常组与大黄组相比无统计学意义,阴虚组疼痛阈值高于阳虚组,但无统计学意义。(3)阴虚组、阳虚组与正常组相比胃肠道通过时间均有统计学意义(P<0.01);大黄组与正常组相比有差异(P〈0.05);麻子仁丸、济川煎与阴虚和阳虚组相比均有统计学意义(P(0.01),而与大黄组无明显差异:阴虚组的胃肠道通过时间高于阳虚组,但无统计学意义4)济川煎、麻子仁丸组能够提高大鼠粪便的含水量,与阳虚组、阴虚组相比差异显著(P〈0.01),与正常组相比无统计学意义;大黄组、阳虚组、阴虚组与正常组相比差异显著(P〈0.01);济川煎组和麻子仁丸组与大黄组相比有统计学意义(P〈0.05);阴虚组含水量少于阳虚组,但无统计学意义。(5)观察病理切片发现,大黄组与正常组相比平滑肌减少,淋巴细胞增加密集成群;阳虚组、阴虚组与大黄组相比,淋巴细胞密集成群,甚至侵入粘膜层,平滑肌细胞胞体萎缩,平滑肌层破坏严重,组织减少,结构紊乱,其中,阴虚组淋巴细胞明显多于阳虚组,结构更加紊乱甚至平滑肌消失。麻子仁丸组和济川煎组明显能够减少淋巴细胞的浸润,平滑肌增厚,结构清晰。(6)济川煎、麻子仁丸组的5-HT转运体、c-kit的基因表达与模型组相比均有增加的趋势,但并无明显的统计学意义。其中,c-kit中与正常组相比均有统计学意义(P〈0.01);阳虚组表达水平低于阴虚组,但无统计学意义;麻子仁丸和济川煎能够提高c-kit基因表达水平,但与大黄组、阴虚组和阳虚组相比,亦无统计学意义。在5-HT转运体中,大黄组、阴虚组和阳虚组与正常组相比均有统计学意义,而麻子仁丸组与正常组相比无统计学意义;阴虚组、阳虚组的基因表达低于大黄组,阴虚组低于阳虚组但无统计学意义。研究结论:(1)麻子仁丸和济川煎是治疗便秘的常用方剂,能有效改善便秘状况。(2)STC和结肠的内脏敏感性相关。(3)麻子仁丸和济川煎是通过提高大鼠粪便的含水量、缩短粪便的胃肠道通过时间、降低胃肠道的内脏敏感性来改善便秘状况。(4)麻子仁丸和济川煎能够增加便秘动物胃肠道的5-HT转运体、c-kit基因含量,改善结肠的病理形态。(5)阴虚便秘与阳虚便秘存在一定的差异,其具体机制有待于进一步的研究