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目的:利用sh RNA转染肺腺癌吉非替尼耐药细胞PC9/GR以干扰PC9/GR细胞中ANGPTL4的表达,观察干扰ANGPTL4后PC9/GR对吉非替尼耐药性的影响及探索其相关机制。方法:1.利用TCGA数据库分析ANGPTL4在泛癌中的表达情况;随后以GEPIA数据库分析ANGPTL4在肺腺癌组织及正常组织的分布差异,以及ANGPTL4在不同分期的肺腺癌患者中表达差异;利用TCGA数据库、GSE数据库下载ANGPTL4高、低表达的肺腺癌患者生存情况,并绘制生存曲线。2.分别培养人肺腺癌细胞PC9和吉非替尼耐药株细胞PC9/GR,并利用q RT-PCR及Western blot方法检测两组细胞中ANGPTL4的m RNA、蛋白质表达水平。3.构建ANGPTL4-sh RNA,并转染PC9/GR细胞,以干扰其ANGPTL4表达,以Western blot方法检测干扰效率。选取PC9、PC9/GR、PC9/GR-sh NC、PC9/GR-sh ANGPTL4四组细胞,予以不同浓度的吉非替尼（gefitinib）药液的培养基处理细胞24h后,利用CCK-8检测IC50,观察ANGPTL4的表达水平对PC9/GR细胞耐药性的影响。4.培养PC9/GR、PC9/GR-sh NC、PC9/GR-sh ANGPTL4三组细胞,分别添加1、1、5mmol/l的吉非替尼培养。以Edu实验、流式细胞术、Transwell、划痕实验检测各组细胞的增殖活性、凋亡水平、侵袭水平、转移水平,明确ANGPTL4与PC9/GR细胞生长、侵袭及转移能力的相关性。5.利用PC9/GR细胞及干扰株构建裸鼠移植瘤模型,分组后以PBS、吉非替尼喂养并记录小鼠体重及肿瘤组织体积变化。6.剥离移植瘤组织进行Ki-67免疫组化及Tunel染色,明确ANGPTL4在组织中对PC9/GR细胞侵袭能力及凋亡水平的影响。7.构建homo-RNA并转染PC9/GR细胞以提高细胞中ANGPTL4的表达水平,并以Western blot检验过表达效率。8.分别提取以上7组细胞的蛋白质,以及四组移植瘤动物模型肿瘤组织中的蛋白质,以Western blot检测各组样本中ERK1/2、以及BAX、Bcl-2、caspase 8、cleaved-caspase 8等凋亡相关蛋白的表达水平,以在细胞、动物层面,在干扰、过表达情况下ANGPTL4与ERK1/2凋亡通路的上下游调控关系。结果:1.通过挖掘TCGA、GEPIA、GSEO数据库内患者信息,证实ANGP-TL4在多种恶性肿瘤组织中表达升高,在且与患者预后呈明显负相关（p＜0.05）。2.q RT-PCR及Western blot实验均发现PC9/GR细胞较PC9细胞中具有更高的ANGPTL4表达水平（p＜0.01）。3.与PC9相比,PC9/GR的IC50更高,证实PC9/GR较PC9对吉非替尼的敏感性低,而干扰ANGPTL4可增加吉非替尼的药物敏感性（p＜0.01）。4.与con组对比,G组细胞具有较低的增殖活力及侵袭能力,而凋亡水平增加;而sh-ANGPTL4组较之G组细胞具有更低的增殖活力及侵袭能力,且凋亡水平显著增加（p＜0.05）。5.con+G组、sh-NC+G组、sh-ANGPTL4组、sh-ANGPTL4+G组裸鼠,体重生长变化差异不明显,而肿瘤体积依次缩小（p＜0.05）。6.与con+G组相比,sh-NC+G组肿瘤组织中Ki-67表达水平及凋亡小体数目无明显变化,而sh-ANGPTL4组肿瘤组织中Ki-67表达水平及凋亡小体数目较con+G组增高（p＜0.01）,在sh-ANGPTL4+G组中差异有显著性（p＜0.001）。7.Western blot实验证明:在干扰了ANGPTL4表达的PC9/GR细胞株及移植瘤组织中p-ERK1/2表达降低,而凋亡蛋白增加;过表达PC9/GR细胞的ANGPTL4后,p-ERK1/2则表达升高,凋亡蛋白表达水平随之下降。结论:ANGPTL4可通过调控ERK1/2通路抑制肺腺癌PC9/GR细胞凋亡,进而促进吉非替尼耐药性的产生。