ME1和ME2在肾癌中的表达及其功能研究

来源 :哈尔滨工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sirius1394
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肿瘤是常见的人类疾病,肾癌是其中之一,组织较多的脂质堆积,其代谢的异常特点能够引起人们对其代谢机制进行探索。苹果酸酶在细胞内催化苹果酸转化成丙酮酸,产生NADPH或者NADH。据报道,ME1和ME2在癌症中存在表达差异,与肿瘤相关基因的调控存在联系,因此其生物学功能作用愈发凸显,主要表现在肝癌、乳腺癌和鼻炎癌等肿瘤中。目前为止,肾癌中ME1和ME2的细胞生物学特点基本没人报道。本论文主要针对ME1和ME2在肾癌中的作用,做出以下研究内容。利用肾癌组织和肾癌细胞系,研究ME1和ME2在肾癌中的表达差异。主要利用q RT-PCR实验检测肾癌中ME1和ME2的RNA水平的变化;利用western blot实验检测肾癌中ME1和ME2的蛋白变化;利用免疫组化实验检测肾癌切片中ME1和ME2的分布特点及表达特点;另外,从肾正常细胞系和肾癌细胞系中对照比较ME1和ME2的变化。实验结果发现,与正常组织相比,ME1和ME2在肾癌中表达是降低的,而ME1的降低程度更加明显。细胞系是脱离体内组织的生物环境,其相关基因的表达差异与组织不太一样。为了探索ME1在肾癌中的功能,主要利用与组织特点相符表达的肾癌细胞系RC2,通过病毒包装,感染肾癌细胞系,促使肾癌细胞系RC2中ME1过表达,检测细胞的增殖、凋亡、周期和ROS的水平变化。实验结果发现,过表达ME1后,RC2细胞的增殖能力明显下降,通过流式细胞仪检测,过表达ME1对肾癌细胞系RC2在凋亡方面没有影响,同时,检测细胞周期发现,过表达ME1能够引起细胞的周期阻滞,停滞于G1期。据报道,ROS能够诱导细胞增殖也促进细胞凋亡,过表达ME1的RC1细胞,其ROS水平明显高于对照组细胞,具体ME1诱导ROS的产生对肿瘤的发生发展有何作用有待于进一步研究。肾癌中ME1能够抑制细胞周期的循环与肾癌组织肿瘤的特点相符,可进一步探究ME1在调控细胞周期方面的影响。ROS是肿瘤检测的功能指标,研究ME1诱导ROS产生的具体机制是下一步工作的重点。
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