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研究背景结肠癌是我国最常见的消化道恶性肿瘤之一,发病率和病死率呈逐年上升趋势,全世界每年大约有60万人死于结肠癌。结肠癌的发病是由外部环境因素和机体内部因素共同作用的结果,外部环境因素包括直接接触一些致癌物质和养成不良的生活习惯(如饮食不合理、吸烟等),内部机体因素诸如抑癌基因的失活及原癌基因的突变,使细胞生长调节失去控制,导致肿瘤形成。其发展和演变是一个复杂的生物学过程,涉及到关键信号通路中多种基因表达的异常。早期结肠癌的治疗主要以手术为主,辅以放疗和化疗,然而多数患者就诊时已进展至中、晚期,晚期结肠癌的治疗效果不理想,总体预后较差。因此,探讨结肠癌发生过程中的分子机制对其诊断、治疗及判断预后有着极其重要的作用。星形胶质细胞上调基因-1(Astrocyte elevated gene-1,AEG-1),也称异黏蛋白(MTDH),最开始是在被HIV-1感染或使用病毒糖蛋白gpl20、TNF-a处理过的人类胎儿星形胶质细胞中发现的。它是近年来被确定的原癌基因,与肿瘤的增殖、侵袭、转移、血管生成及化疗耐药性等密切相关,已被证实在多种人类肿瘤中过表达,可通过影响PI3K/Akt、Wnt/β-catenin、NF-κB等多条信号传导通路而参与肿瘤发生、发展。β-catenin(β-连环蛋白)是一种多功能蛋白质,广泛存在于细胞膜、胞质和胞核中。正常情况下,细胞膜上的β-catenin在细胞连接处与钙粘素形成粘合带,是一种重要的细胞粘附分子和细胞骨架蛋白。β-catenin作为Wnt信号通路中的关键因子,它的异常表达可作为Wnt信号转导通路活化的指标。淋巴增强因子(lymphoid enhancer factor-1,LEF-1),是Wnt信号通路中重要核内转录因子,在调控转录中起分子开关作用,其通过与β-catenin相结合,形成β-catenin-LEF/TCF复合物,激活细胞核内下游靶基因而激活Wnt信号通路。LEF-1介导的信号通路参与肿瘤的增殖、分化、侵袭和转移。研究目的通过检测结肠癌组织中和相应癌旁组织中AEG-1、β-catenin和LEF-1的表达,分析三者在结肠癌中的表达及其临床意义。材料与方法1.收集郑州大学第一附属医院经肛肠外科及胃肠外科手术切除并经病理科证实的人结肠癌组织78例和78例相应癌旁正常组织(距结肠癌远端5cm以上),所有标本均经中性甲醛固定、石蜡包埋,所有患者术前均未行化疗、放疗和生物靶向治疗等,其中男性44例,女性34例;年龄35-76岁(平均年龄55岁);原发部位:左半结肠33例,右半结肠45例;按病理学分级:中高分化46例,低分化32例;按有无淋巴结转移:无淋巴结转移35例,有淋巴结转移43例;按有无远处转移:未发现远处转移59例,发现有远处转移19例;2.应用免疫组化SP法分别检测AEG-1、β-catenin和LEF-1在结肠癌组织及相应癌旁正常组织中的表达,并分析其与结肠癌不同病理因素的关系及相互间的相关性,研究三者在结肠癌发生发展中的作用。3.统计学方法应用SPSS17.0统计软件对所有数据进行统计学分析。各组间比较采用χ2检验,AEG-1、β-catenin和LEF-1间相关性采用Spearman等级相关分析。检验水准α=0.05。结果1.AEG-1的表达AEG-1阳性表达主要位于细胞浆或/和细胞膜,其在癌组织中的阳性表达率为73.1%(57/78),显著高于其在癌旁正常组织中的表达24.4%(19/78),两者相比,差异具有统计学意义(χ2=37.05 P<0.001);AEG-1的表达与患者的组织分化程度(χ2=5.737 P=0.017)、淋巴结转移(χ2=5.518P=0.019)、远处转移(χ2=5.990 P=0.014)及TNM分期(χ2=6.673 P=0.010)相关。2.β-catenin的表达β-catenin异常表达是以细胞浆或(和)细胞核表达为主。其在癌组织中的异常表达率为82.1%(64/78),显著高于其在癌旁正常组织中的表达30.8%(24/78),两者相比,差异具有统计学意义(χ2=41.71 P<0.001);β-catenin的表达与患者淋巴结转移(χ2=4.865 P=0.020)、远处转移(χ2=9.953P=0.002)及TNM分期(χ2=4.808 P=0.028)相关。3.LEF-1的表达LEF-1阳性表达主要位于细胞核内,少量位于胞浆。其在癌组织中的阳性表达率为67.9%(53/78),显著高于其在癌旁正常组织中的表达21.8%(17/78),两者相比,差异具有统计学意义(χ2=33.58 P<0.001);LEF-1的表达与患者的淋巴结转移(χ2=5.442 P=0.020)、远处转移(χ2=5.344 P=0.021)及TNM分期(χ2=1.139 P=0.001)相关。4.AEG-1、β-catenin及LEF-1在结肠癌组织中表达的相关性采用Spearman等级相关分析显示,结肠癌组织中AEG-1和β-catenin的表达存在正相关性(r=0.243,P=0.032);AEG-1和LEF-1的表达亦存在正相关性(r=0.326,P=0.004)。结论1.结肠癌的发生与AEG-1、β-catenin及LEF-1的异常上调有关,三者可为结肠癌的治疗提供潜在靶点。2.AEG-1、β-catenin及LEF-1在结肠癌不同的淋巴结转移、远处转移及TNM分期中存在差异,表明三者的异常表达在结肠癌的侵袭、转移中发挥重要作用。3.AEG-1与β-catenin、LEF-1在结肠癌组织中的表达呈正相关,提示三者可能通过某种联系共同参与结肠癌的发生发展。