野木瓜苷类物质对K562细胞增殖影响的初步研究

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目的:提取、分离和纯化野木瓜苷类物质,观察它们对K562癌细胞增殖的影响;并探讨木犀草苷抑制K562癌细胞增殖的可能机制,为野木瓜苷类物质作为抗癌药物的开发提供理论依据。方法:通过振荡提取法、硅胶柱层析、反相柱层析和HPLC制备柱对野木瓜中含有的苷类物质进行提取、分离和纯化,并用紫外光谱法和质谱法对产品进行表征;以K562癌细胞为实验对象,分别采用MTT法、荧光法及细胞流式法,观察苷类物质的抑癌作用,探讨可能的抗癌机制。结果:从野木瓜苷粗提物AI中获得三萜类皂苷和黄酮苷,分别用齐墩果酸和木犀草素标定含量,得到三萜类皂苷的含量是52.4%,黄酮苷的含量是17.9%;AI经过硅胶柱层析和反相柱层析,得到AI5.1,AI5.2,AI5.3和AI5.4;这4个产品对K562细胞的增殖都有抑制作用,其中AI5.4的抑制率最高,为43.37%(P<0.01);AI5.4经过HPLC制备柱的进一步分离,得到10种产品;它们在1mg/L的浓度下对K562癌细胞的增殖都有抑制作用,抑制率范围从15.89%(P<0.05)到33.11%(P<0.01),其中AI5.4-2、AI5.4-6抑癌效果最好;AI5.4-6的质谱分析显示野木瓜YM7的特征峰,而AI5.4-2的质谱分析显示野木瓜YM2的特征峰和齐墩果酸的特征峰,可以断定野木瓜AI5.4-2是木脂素苷和三萜类皂苷的混合物,AI5.4-8的质谱分析显示野木瓜YM10的特征峰,野木瓜YM10是AI5.4-8的主要成分;木犀草苷和木犀草素对K562癌细胞都有增殖作用,在相同浓度下的木犀草苷的抑制率较高;加入2.5 mmol/L葡萄糖后木犀草苷对K562癌细胞增殖的抑制率变小了。结论:野木瓜苷类物质对K562癌细胞的增殖有抑制作用;木犀草苷抑制作用比木犀草素强。
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