棉花秸秆木质纤维素降解及其青贮复合菌系的筛选和协同机理研究

被引量 : 6次 | 上传用户:hh2006pk
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
为推进我国新疆棉秆作为粗饲料利用的进程,缓解新疆饲草资源短缺,针对棉花秸秆降解方面的研究,首先对棉花秸秆的预处理进行优化,确定其最适预处理方法;其次筛选适宜棉花秸秆青贮的乳酸菌复合菌系和木质纤维素降解复合菌系。从青贮样品中、禾本科牧草中分离乳酸菌,利用16S rDNA和生理生化指标测定对乳酸菌株进行鉴定。采用PCR-DGGE技术对青贮复合系的稳定性和多样性进行分析;筛选降解棉花秸秆纤维素复合系,利用微生物分泌的纤维素复合酶加快木质纤维素分解,测定纤维素复合系的降解能力和酶活性,采用PCR-DGGE技术对木质纤维素降解复合菌系的稳定性和多样性进行分析。棉秆预处理和酶解,在碱与微波同时处理基础上添加绿色木霉处理失重率最高(18.90%),碱与微波同时处理后添加绿色木霉处理酶解率最好(31.84%):硫酸处理糖化率最高(18.30%);碱与微波同时处理后的棉杆经绿色木霉处理后葡萄糖得率最高(1.01%),预处理和酶解都能提高纤维素的降解率。青贮乳酸菌的鉴定结果,鉴定出了8种分别为地衣芽孢杆菌(Bacillus lichenniformis)、面包乳杆菌(Lactobacillus crustorum)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)、于酪乳杆菌(Lactobacillus case)、乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)、肠球菌属(Enterococcus)、葡萄球菌属(Staphylococcus)和芽孢杆菌属(Bacillus)。筛选出了适合棉花青贮的青贮复合菌系,青贮复合菌系连续培养到第20代后趋于稳定,通过PCR-DGGE分析和测序结果,青贮复合菌系主要由B. lichenniformis, L. crustorum, L. rhamnosus和L.casei组成。分离出了降解木质纤维素的菌株5株,在连续培养20 d,对纤维素和木质素的降解率分别为XT4:20.91%、13.71%; XT3:21.43%、9.46%; XT2:22.19%、11.76%; XM4:16.74%、 11.45%; XM3:19.74%、11.16%。把5株纤维素降解菌与木质素降解菌黄孢原毛平革菌进行混合发酵,通过固体发酵20d,混合发酵能够提高棉花秸秆中木质纤维素降解率,结果分别为XT2+PC:34.26%、25.44%; XT3+PC:29.29%、28.69%、 XT4+PC:35.09%、27.61%、 XM4+PC:27.67%、32.4%; XM3+PC:44.11%、19.5%.棉秆木质纤维素降解菌株初步鉴定结果T2、M3和T4为Claodosporium、Aspergillus、Penicillium; T3为Bacillus subtilis, M4为Bacillus megaterium。采用PCS培养基对牛粪、土壤、瘤胃和发酵粪中筛选纤维素分解复合菌系,进行连续继代培养,获得稳定的复合菌系,在连续继代20代后,仍保持稳定的降解效果。对棉秆木质纤维素降解复合菌系进行了发酵优化;对木质纤维素降解复合菌系进行了优化,氮源种类、发酵起始pH和接种量对CMC、FPA、B-G酶活和糖化率和失重率的影响达到极显著水平(p<0.01),温度对FPA酶和失重率的影响达到显著水平(p<0.05),对糖化率的影响达到显著水平(p<0.05),对CMC、B-G酶的影响未达到显著水平。得出最优的发酵工艺为:温度42℃,氮源(NH4)2SO4,接种量1.0%,发酵起始pH值7.0。添加PEG 6000的内切酶、β-G和FPA酶活性增加幅度最高,分别达到93.33%,136.93%和73.15%,PEG 4000对外切酶活性增幅最大;PEG 6000能提高MnP和LiP酶的活性,分别为110.89%和62.29%。PEG 2000、4000、6000和8000,纤维素降解率由没有添加表面活性剂的19.48%分别提高到24.5%,26.71%,33.1%和30.01%:木质素纤维素降解率对照的9.91%分别提高到19.21%,22.51%,30.45%和27.76%,其中PEG 6000效果最好。添加3.0g/L PEG6000纤维素的转化率最高,达到58.12%(p<0.05);添加3.0 g/L PEG 6000能保持上清液中较高的蛋白浓度,水解3h后,没有PEG6000, FPA从0.1245 FPU/mL下降到0.012 FPU/mL下降了90.37%,添加PEG 6000, FPA酶的活性恢复到0.041 FPU/mL;水解48h,添加PEG 6000和不添加PEG 6000纤维素的转化率分别达到65.71%和54.68%,添加PEG 6000提高纤维素转化率20.18%。PEG 6000可以提高木质纤维素的转化率。青贮复合菌系、木质纤维素降解复合菌系与白腐菌协同作用测定结果,白腐菌与木质纤维素降解复合菌系发酵,β-G葡萄糖苷酶(β-G)、锰酶(MnP)和漆酶(Lac)分别提高了23.34%、85.85%和150.00%:青贮复合菌系与木质纤维素降解复合菌系发酵, CMC和β-G酶分别被提高了41.98%和48.22%。青贮复合菌系、木质纤维素降解复合菌系与白腐菌协同发酵,Lac、木质素过氧化物酶(LiP)、CMC和β-G分别被提高了50.00%、41.18%、29.75%和84.85%。木质纤维素降解复合菌系发酵,葡萄糖转化系数最高达26.86%。棉秆失重率为24.27%~52.87%。青贮复合菌系、木质纤维素降解复合菌系与白腐菌协同发酵,半纤维素被降解42.69%,纤维素被降解44.30%,木质素被降解30.45%。CP含量被提高5.06%~9.37%。白腐菌与木质纤维素降解复合菌系发酵,DM降解率达到最高。棉秆纤维素降解菌系、白腐菌和青贮乳酸菌在木质纤维素生物降解过程中的协同作用可以大大提高棉秆在体外和尼龙袋中的降解效率。
其他文献
通常情况下,评价光学成像系统像质的几个重要参数,如能量集中度(Strehl比)、分辨率、焦深等,都是以标量衍射理论为基础进行计算和分析的.考虑光波的矢量偏振特性,尤其是在高
目的探讨MR T2^* mapping技术评估干燥综合征(SS)涎腺病变的价值。方法前瞻性收集43例临床确诊的SS患者(SS组)和40名健康志愿者(对照组),对双侧腮腺及颌下腺行含T2 mapping的
<正>师:米洛斯的维纳斯雕像,其体态、肌肤、容貌都同活生生的真的美人一样,真可谓是达到了艺术描写人体美的极致。她那微微扭转的姿势,使半裸的身体构成了一个十分和谐而优
<正>基于符号互动论视野下的班级墙面环境的创设进行研究幼儿的各种互动行为,如师幼互动、同伴交往等以及在此过程中产生的各种沟通、交流和合作,都可以通过这种微观视角来从
会议
<正>从服饰到数码产品,一则《男人帮》的京东新广告,已经诠释了京东全品类电商的新形象。Fashion,什么是Fashion?眼镜要戴没有镜片的,看不清戴隐形啊;西服不一定要打领带,混
<正> 实行院务公开是进一步深化医院民主管理的重要举措,也是全面落实全心全意依靠广大教职员工、学生办好医院的具体体现,这种把医院重大事项、重大决策、涉及群众切身利益
<正> 兼有杭州西湖、太湖、洞庭湖、昆明湖(汉武帝时西安的昆明湖)四大名湖特色的颐和园风景,始于金元,兴于明代,而盛于清代,闻名帝京。由1750年乾隆兴建清漪园至今两百多年
塔河油田近年在岩性油气藏勘探中取得了重大的突破,发现并落实了阿克亚苏2号上油组复合圈闭、塔河南中油组河道砂体岩性圈闭等,在其上部署的AT2、YT2等井都喜获工业油气流,展
商誉是指购买成本超过被并企业净资产公允价值的差额部分,但在实际情况中可能出现被并企业净资产公允价值大于购买成本的情况。这种情况称之为负商誉,负商誉的综合性使得负商
肝癌的病理学分级是肿瘤预后独立的预测因素,低分化肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)术后复发率高、预后差,因此客观的评价肿瘤的病理分级对于治疗方案的选择、预后