基于肠道菌群探索加味人参养荣汤治疗气虚证的知识图谱及临床研究

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目的:1.基于文献计量学手段,分析现阶段聚焦于肠道菌群的中医药研究现状,发掘该领域的研究趋势和热点。2.探索气虚证患者的肠道菌群特征,总结两者之间的相关性;并基于肠道菌群探讨加味人参养荣汤的临床有效性及其发挥补气疗效的可能机制。方法:1.本文运用VOSviewer和Citespace软件对Web of Science核心数据集中与肠道菌群相关的中医药文献进行梳理,并分别以国家(地区)、机构、作者和关键词为研究对象,进行知识图谱可视化分析。2.从2018年3月至2019年3月,在湖北省中医院门诊共招募气虚证受试者20例。同时招募健康志愿者10例。其中,气虚证受试者被给予加味人参养荣汤治疗8周,而健康受试者不予以任何药物干预。分别收集每组受试者的一般人口学信息,接着施以临床量表评价,分析加味人参养荣汤治疗气虚证的临床有效性。同时,采集受试者的粪便标本,并利用高通量测序技术,分析比较气虚证受试者与健康志愿者之间以及气虚证受试者治疗前后的肠道菌群组成结构的差异。结果:1.共检索到符合要求的文献273篇。文献数量从1998-2019年逐年增长,且2017年以来文献数量的增长速度明显加快。参与的国家(地区)、机构和作者以国内为主,整体的合作网络较稀疏。研究者关注的疾病以消化系统及内分泌系统疾病为主,关注的中医证候主要为脾虚证,关注的治疗药物以中药单药及其提取物为主。2.气虚证受试者与健康志愿者在性别、年龄和BMI方面的差异无统计学意义(P>0.05)。在给予加味人参养荣汤治疗后,第2、4、6、8周的中医证候有效率分别为40%,75%,70%和80%。CMH卡方检验结果显示,临床疗效整体随疗程的增加而提高(P<0.01)。单因素重复测量方差分析表明,Qi S、FS-14、FSAS和MFI-20量表评分整体随疗程的增长而呈下降趋势(P<0.001)。3.本研究共检测到3056257条Tags,平均每个样品61125条。在97%相似度下将Clean Tags聚类为551个OTU。物种累积曲线表明本研究所收集样本量的充分性及其菌群物种丰富度较高。结合稀释曲线可知,本研究已检测到样本中的绝大部分物种。HG、QD.W0及QD.W8之间的alpha多样性指数无显著差异(P>0.05)。在Beta多样性分析中,笔者发现三组样本在OTU、属和种分类水平显著分开,而在门分类水平未见明显差异。相较于HG,厚壁菌门与拟杆菌门的相对丰度比值在QD.W0升高,而在给予药物干预后该比值降低。相较于HG,蓝藻菌门、c-Chloroplast、o-Streptophyta、g-Odoribacter和s-Clostridium_methylpentosum在QD.W0中显著富集(P<0.01)。相较于QD.W0,变形菌门的丰度在QD.W8显著升高(P<0.01)。4.拟杆菌属的丰度与Qi S评分呈正相关关系。蓝藻菌门的丰度与FSAS和MFI-20均呈正相关关系。乳杆菌属的丰度与Qi S评分呈负相关关系。肠球菌属的丰度与FS-14、FSAS和MFI-20评分均呈负相关关系。Gemmiger属和小杆菌属的丰度均与FSAS呈负相关。优杆菌属和普雷沃氏菌属的丰度均与MFI-20呈负相关。结论:1.目前,肠道菌群日益受到中医药研究者的关注。在今后的研究中,研究者需进一步加强跨区域、跨机构、跨团队的多元化合作。2.临床研究表明,加味人参养荣汤治疗气虚证安全且有效。气虚证患者肠道菌群的组成结构与健康人群存在一定差异,而加味人参养荣汤可以在一定程度上调节人体肠道菌群的结构,这也可能是其发挥“补气”疗效的潜在机制。
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