稻米基质影响红曲霉次生代谢产物机理的研究

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红曲是中国传统中药材之一,最早始用于唐代,已经有一千多年的历史,是由红曲霉接种在大米上的发酵产品。红曲中研究最为广泛的次级代谢产物为洛伐他汀类的Monacolin K和红曲色素。Monacolin K是目前世界上公认的降低胆固醇的有效物质。红曲色素作为一种天然的食品着色剂,有研究发现它还具有降低胆固醇的功效,并且不会产生横纹肌溶解症等副作用,因此,极有潜力被开发成为新型的降血脂产品。本论文主要研究的就是红曲霉中的两种次级代谢产物红曲素和Monacolin K。实验中使用不同品种稻米基质进行固态发酵实验。探究红曲发酵产物中红曲素和Monacolin K产量呈现巨大差异的原因。不同发酵基质对红曲发酵产物中红曲素的影响极为显著。根据液相检测结果,以精米作为发酵基质,红曲素的产量高于以糙米为发酵基质。因此筛选出SD-2作为高产红曲素的原料米。本实验通过制备型高效液相色谱法制备红曲素的标准品,将制备的红曲素产品,用分析型高效液相检测纯度均在95%以上,经液质联用和核磁共振分析,制得的色素产品被确定为红曲素。将红曲素配制成标品溶液,用作定量分析。TD-6和TD-3对红曲发酵产物Monacolin K的产量影响显著。分别于14d、21d和28d取样测定,均是TD-6发酵产品中Monacolin K产量高于TD-3。到28天时,TD-3和TD-6发酵产品中的Monacolin K的总产量分别为1.35 mg/g和4.39 mg/g,TD-6发酵产物中Monacolin K含量是TD-3的4.39倍。通过扫描电镜观察,TD-6淀粉颗粒表面光滑,粒度分布较均匀,TD-3淀粉颗粒表面粗糙,粒度分布不均匀,形状不规则,灭菌后中间出现较多空穴,此外,TD-6淀粉颗粒之间较疏松,会有利于氧气和菌丝的进入,进而有利于红曲霉的生长。以TD-6为发酵基质,菌丝密且粗,长势优于TD-3。采用化学方法测定发酵基质中直链淀粉含量,TD-6直链淀粉含量为4.08±0.61%,TD-3未检测出直链淀粉。因此,推断得出直链淀粉含量对稻米基质空间构象的影响,进而影响红曲霉菌丝生长,是导致Monacolin K产量差异的原因之一。
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