拟南芥晚花突变基因的定位

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开花转变是植物个体发育中最关键的过程。在模式植物拟南芥(Arabidopsisthaliana)中,存在4条互相依赖、共同作用的调控开花时间的信号途径,包括光周期途径、春化途径、自主途径和赤霉素途径。通过分离、鉴定各种早花、晚花突变体,已经克隆了许多开花时间基因,但相对于植物开花调控的复杂性,我们所掌握的信息仍然很有限。我们以模式植物拟南芥为材料,在Columbia生态型中筛选得到一个晚花突变体,命名为flowering locusx(FLX)。本研究构建了基因定位的作图群体,对开花控制基因flx进行了定位,并且研究了春化作用对该晚花突变体的影响。  首先将突变体flx植株与不同遗传背景的野生型Ler杂交产生子一代(F1),F1代自交产生F2代。从播种的2350株F2代植株中选出了370株具有晚花表型的植株作为基因定位的作图群体。然后利用以PCR为基础的简单序列长度多态性标记(SSLP)对作图群体中的所有个体进行检测,通过分析目的基因flx与各分子标记之间的连锁关系,将开花控制基因flx定位于拟南芥第5条染色体分子标记T24H18-25983附近。  同时,本论文工作对突变体flx和野生型Col分别进行3周、4周、5周和6周的春化处理,同期种植正常春化处理2天的突变体flx和野生型Col作为对照,分析了春化作用对拟南芥晚花突变体flx开花时间的影响。实验结果显示,突变体经flx春化处理5周后,晚花表型基本被逆转,表型和野生型Col基本一致,当春化处理6周后,基本不能再进一步加速开花进程,春化处理达到饱和状态。因此,我们认为FLX基因突变并不影响对春化作用的应答,也就是说,突变基因flx对于开花的抑制并不是通过春化作用途径实现的。
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