维生素D、胆碱、L-肉碱是动物生长过程中不可缺少的维生素。它在人体脑发育和开发认知、记忆与学习能力方面有很重要的作用,在婴儿配方奶粉中添加适量的维生素D、胆碱、L-肉碱是十分必要的。人体如果缺乏这些维生素,可能引起多种疾病。以往测定维生素D、胆碱、L-肉碱的方法有高效液相色谱法、分光光度法等。现行的国家标准测定奶粉中胆碱按照GB/T 5413.20-1997,采用的是酶反应显色分光光度法;检测维生素D按照GB/T 5413.9-1997采用的是高效液相色谱法;检测奶粉中L-肉碱还没有国标方法。有些奶粉及奶饮料中的维生素D添加量很低,按国标高效液相色谱方法通常由于干扰大,很难准确测定;面对现在复杂的市场,用分光光度法测胆碱,更加不能满足准确测定的要求。近些年可参见的文献中也有很多方法,如高效液相色谱-电化学检测法、化学发光法及离子色谱-电导检测法测胆碱,衍生化高效液相色谱法测L-肉碱等,但未见高效液相色谱-质谱法对奶粉中维生素D、胆碱、L-肉碱含量测定的报道。本论文建立了高效液相色谱-质谱法对奶粉中维生素D、胆碱、L-肉碱含量的测定。通过大量试验,得到了最优化的样品前处理条件、液相色谱分离条件和质谱参数。维生素D、胆碱、L-肉碱的最低检测限分别达到为10μg/L、0.1μg/L和1.0μg/L,添加回收率分别为76.8 %～83.9%、84.4%～105.6%和93.7%～99.3%。方法操作简单,灵敏度高,选择性强,能克服传统方法中繁琐,准确度低等缺陷和不足。为奶粉中这三种维生素的含量测定的国标方法改进提供了参考方法,同时也适用于对其他液态奶,奶饮料及保健品中维生素D、胆碱、L-肉碱含量的测定及确证。