嗅觉受体从内质网运输到细胞膜表面,需要经过多个步骤,包括在内质网折叠后输出、输出高尔基体以及上膜和上膜后对其配体的功能性反应。在非嗅觉组织来源的异源性细胞系中表达嗅觉受体,通常会滞留在内质网以致于不能到达细胞膜表面,而在异源细胞系中共同转染RTP1S蛋白,可使嗅觉受体成功上膜并正确发挥其功能。迄今,RTP1S做为一个辅助蛋白究竟是如何促进嗅觉受体在从内质网运输到细胞膜表面并发挥其功能的机制尚不清楚。我们对RTP1S进行了一系列结构功能学研究,试图通过发现RTP1S帮助嗅觉受体上膜的过程中起关键作用的结构域来揭示其作为嗅觉受体辅助蛋白的具体功能。首先,通过对一系列RTP1S截短体、嵌合体和突变体的分析,我们确定了一些对嗅觉受体上膜和功能至关重要的片段,并基于此结果进一步锁定了若干较之其它位点对RTP1S的功能相对更为重要的氨基酸残基。通过检测各RTPlS变体的亚细胞定位,我们发现RTP1S蛋白的N端对于嗅觉受体输出内质网至关重要,而其中间片段是嗅觉受体从高尔基体到细胞膜运输这一阶段所必不可少的。其次,我们以不同的脂质尾巴修饰RTP1S跨膜区,发现这些修饰体虽然能上膜,但完全丧失对气味化合物的反应。之后的蔗糖梯度离心实验表明RTP1S跨膜区将其正确定位在细胞膜中的脂筏区是嗅觉受体正确发挥功能所必须的。最后,通过蛋白相互作用实验,我们发现RTP1S是通过其C端与嗅觉受体相互作用的。上述发现提示RTP1S通过多元化及多步骤的方式,帮助嗅觉受体克服从合成至膜上作用过程中的一系列阻碍,揭示了其在促进嗅觉受体的功能性表达的关键角色,这些结果为今后研究RTP蛋白家族在辅助G蛋白偶联受体等蛋白上膜的机制提供了新的线索。