山药黏液酶解物的制备及免疫活性研究

来源 :河南科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yinyueemo1122334
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
作为传统保健性食品,山药供需量大,具有较多生理活性,在国内外受到普遍欢迎,大量研究发现,山药中的主要特点是含有大量多糖-蛋白复合物,即黏液,但黏液黏度极大,不利于生产相应的食品及保健品,因此本文以铁棍山药(Dioscorea opposite Thunb.cv.Tiegun)为研究对象,选用胰蛋白酶、纤维素蛋白酶、复合蛋白酶对山药黏液进行酶解,运用正交试验优化三种酶的酶解工艺,对山药黏液及其酶解物的结构特征进行了测定,并探索了不同酶解物对免疫抑制小鼠的免疫器官、细胞、分子的调节能力,以期获得山药黏液及其酶解物对机体的免疫活性影响差异及结构与免疫活性间的关系,为山药黏液在保健品研发、新型食品开发及免疫药品研制提供理论依据。  本研究主要内容包括:⑴盐提醇沉方法提取山药黏液,通过正交试验优化山药黏液的提取工艺,研究了 NaCl浓度、浸提时间、料液比对黏液中多糖和蛋白含量的影响,确定了山药黏液提取最佳工艺为:NaCl浓度为0.6mol/L,浸提时间24h,料液比1:10;在此提取条件下,总蛋白含量为56.93%,总糖含量为40.87%,黏液的得率为0.313%。通过正交试验分别优化胰蛋白酶、纤维素酶、复合蛋白酶酶解山药黏液的工艺,研究了加酶量、酶解 pH、酶解时间、酶解温度对胰蛋白酶和复合蛋白酶酶解过程中水解度的影响,以及在纤维素酶酶解过程中还原糖含量的影响,得到胰蛋白酶酶解山药黏液的最佳工艺条件为:加酶量为5000U/g,酶解 pH值为8,酶解温度为40℃,酶解时间4h,在此条件下,胰蛋白酶酶解山药黏液的水解度为46.78%;纤维素酶酶解山药黏液的最佳工艺条件为加酶量为6000U/g,酶解温度为50℃,酶解pH值为5.5,酶解时间3h,在此条件下,纤维素酶酶解山药黏液的还原糖含量为30.49%;复合蛋白酶酶解山药黏液的最佳工艺条件为加酶量为7000U/g,酶解 pH值为7,酶解温度为40℃,酶解时间为2h,在此条件下,复合蛋白酶酶解山药黏液的水解度为30.36%。⑵山药黏液及其酶解物的结构特征:SDS-PAGE测定结果显示纤维素酶酶解物除外,酶解后分子量变小;经红外扫描,山药黏液及其酶解物中存在二级结构为α-螺旋结构,糖苷键为吡喃型的分子,酶解切断了山药黏液分子间的氢键,其中纤维素酶作用于β-(1-4)糖苷键;紫外全波长扫描中,利用β-消除反应,证明山药及其酶解物中存在 O-糖苷键,3种酶酶解并没有破坏此糖苷键;电镜扫描后发现四种物质分子在分子间距、分子形态上有差异。⑶山药黏液及其酶解物的免疫活性:通过免疫抑制小鼠体内免疫器官指数,腹腔巨噬细胞吞噬能力,迟发型变态反应,血清溶血素含量测定实验比较了山药黏液及其酶解物的免疫活性,得出不同浓度的山药黏液及酶解物均可提高小鼠免疫调节能力,具有剂效关系,且酶解物的免疫调节能力高于黏液;小鼠脾脏和小肠石蜡切片实验,得出山药黏液及酶解物可以通过提高脾脏的白髓面积和小肠绒腺比(V/C),提高小鼠的免疫防御能力,且胰酶酶解物的免疫调节能力较强;小鼠脾脏细胞因子 mRNA表达量的测定结果说明,山药黏液及其酶解物可以通过恢复 Th2偏移状态来调整免疫机能,且纤维素酶酶解物的调节能力稍强。
其他文献
济南长清黄河公路大桥主桥为102+4×168+102米的连续钢桁梁桥,横桥向两片桁布置,桁间距27米,其主跨跨度及桁间距在目前已建公路钢桁梁桥中都位居前列.主桁采用混合式节点设计
从苦豆子中分离出的苦豆子总碱、苦参碱、氧化苦参碱和槐定碱等多种生物碱,药理研究已证明具有抗病毒、抗炎、抗肿瘤、镇静、抗心率失常等作用,但未见关于苦豆子类生物碱对胆囊运动影响的报道。本论文通过离体实验直接证明苦豆子总碱、苦参碱、氧化苦参碱和槐定碱对胆囊平滑肌收缩运动的影响并初步探讨其作用机制;通过在体实验进一步探讨四种生物碱对胆囊运动功能的影响。实验选用健康豚鼠,体重250-450g,离体实验雌雄不
5月17日,美国国际钛协会欧洲展览会在荷兰阿姆斯特丹召开。在这次钛展览会上,国际钛协会(ITA)、行业高管和商业分析师对钛材世界供应和需求进行展望,阐明日益增长的全球供应
  目的:探讨经皮椎间孔镜下手术治疗青少年高位腰椎间盘突出并椎体后缘离断症的可行性并进行文献复习。方法:对应用椎间孔镜技术治疗的1 例青少年高位腰椎间盘突出并椎体后缘
聚合物电解质是锂离子电池的关键材料之一,具有隔绝正负极片防止电池短路和提供锂离子传输的作用。本论文设计并合成了一种新型的聚合物硼酸锂盐——酒石酸硼酸锂盐(PLTB),并基
  目的:分析总结重度骨盆骨折手术治疗方法和疗效。方法:11例合并骶骨骨折的骶髂关节脱位重度骨盆骨折患者,采用髂腹沟入路、Stoppa入路、后侧入路或联合入路,行切开复位ILIAC
赤石特大桥主桥为 165m+380m×3+165m 的四塔双索面预应力混凝土斜拉桥,简述了汝郴高速赤石特大桥19A标主塔液压爬模施工工艺,并对锚锥预埋、爬架拼装及爬升、轨道爬升等安全
基于纳米复合材料的光学生物传感器具有更高的灵敏度、检测限和稳定性。本论文主要开发了两种新型纳米复合材料作为光学生物传感器的纳米敏感元件,分别构建了乳酸脱氢酶荧光生
  目的:观察冬病夏治治疗膝关节骨关节炎的临床疗效.方法:216 例膝骨关节炎应用冬病夏治治疗后随访.结果:临床治愈120 例(55.5%),显效75 例(34.7%),无效21 例(9.7%),有效率90.3%.结论