【摘 要】
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目的:研究沉默ECEL1对人肝癌细胞(BEL-7404)DUSP1、THBS1、PTEN及EGR1表达的影响。方法:(1)利用ECEL1基因RNA干扰慢病毒感染人肝癌细胞(BEL-7404),与此同时设立对照组,在荧光
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目的:研究沉默ECEL1对人肝癌细胞(BEL-7404)DUSP1、THBS1、PTEN及EGR1表达的影响。方法:(1)利用ECEL1基因RNA干扰慢病毒感染人肝癌细胞(BEL-7404),与此同时设立对照组,在荧光显微镜下来观察肝癌细胞的慢病毒感染效率;(2)使用qPCR技术来检测沉默ECEL1后人肝癌细胞(BEL-7404)ECEL1,DUSP1、THBS1、PTEN及EGR1 mRNA的表达水平。(3)使用WB技术检测沉默ECEL1后人肝癌细胞(BEL-7404)DUSP1、THBS1、PTEN及EGR1蛋白质的表达水平。结果:(1)慢病毒感染人肝癌细胞(BEL-7404)72h后,荧光显微镜下显示肝癌细胞状态良好,感染效率达到80%以上;qPCR技术检测结果显示ECEL1基因的沉默率高达84.1%,shECEL1组ECEL1基因的mRNA表达受到显著抑制(p<0.05)。(2)qPCR技术检测肝癌细胞相关基因mRNA的表达,结果显示:沉默ECEL1后,DUSP1、THBS1、PTEN mRNA表达上调,EGR1 mRNA表达下调。(3)WB技术检测肝癌细胞相关基因蛋白质的表达,结果显示:沉默ECEL1后,DUSP1、THBS1、PTEN蛋白质表达上调,EGR1蛋白质表达下调。结论:沉默ECEL1基因,可以导致人肝癌细胞(BEL-7404)DUSP1、THBS1、PTEN基因表达上调,EGR1基因表达下调。
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