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过去的三十年里外科技术已经取得了巨大的进步,外周神经的离断损伤已能通过外科手进行修复治疗。然而中枢神经系统损伤后,虽然可以通过手术去除压迫因素如骨折块、椎管狭窄等,但其疗效并不令人满意。中枢神经损伤后的修复仍是康复医学领域一个重大挑战。弱激光在周围神经和中枢神经损伤的康复治疗中显示出生物刺激作用,显著提高了神经轴突的再生和促进了神经功能的恢复[1,2]。但是弱激光作为一种有前景的治疗方法,在脊髓损伤中的应用研究较少。为此本实验通过建立大鼠Allen′s脊髓损伤模型,应用光谱分析仪对经大鼠皮肤到达脊髓表面的穿透光谱进行了测量,以期筛选出穿透性最好的激光波长。通过测量穿透功率及组织温度变化筛选出用于大鼠脊髓损伤治疗的弱激光照射参数。目的:(1)利用光谱分析仪在宽谱光源中筛选出从大鼠表皮到脊髓表面穿透性最好波段的光。建立Allen’s大鼠脊髓损伤模型测量该波段的弱激光从大鼠表皮到脊髓表面的穿透功率,通过埋置高灵敏的温度测量仪测量弱激光持续照射对皮肤表面温度和脊髓组织温度的改变,初步筛选出照射参数。(2)利用初步筛选的照射参数对脊髓损伤后的大鼠进行弱激光照射治疗,并对治疗效果进行评价,以确定该参数的有效性。方法:本实验分两部分,(1)第一部分:24只SD大鼠(200-220g)随机分为透射光谱测量组(n=6);功率穿透测量组(n=6)和温度测量组(n=12)。除透射光谱测量组外,应用Allen’s造模法制作大鼠脊髓损伤模型。测量从大鼠皮肤到达脊髓表面的穿透功率,选取到达脊髓表面1mw时为照射功率。将温度测量仪分次置于大鼠照射部位皮下和脊髓损伤部位,观察组织温度的改变,以此筛选照射时间。(2)第二部分:92只SD大鼠分为正常组(n=6)以及Allen′s脊髓损伤造模后(n=86)并随机分为对照组(n=43)、激光照射组(n=43)。根据筛选的照射参数,照射组脊髓损伤后立即低能量激光照射,连续照射14天,对照组术后未行激光照射。对照组和照射组术后第1d、3d、7d、14d和21d分别进行后肢运动功能BBB评分、足印迹实验并灌注取材,用苏木精-伊红染色法(HE)观察脊髓空洞面积并计数周围残存神经元。两组分别于伤后3h、6h、24h、3d和7d取材测定IL-1β和IL-6表达变化。结果:(1)光谱分析示:810nm波段对各层组织的穿透力最强。穿透功率测定示:光斑面积0.2cm2、输出功率100mw时,光功率计开始能探测到穿透功率,到达脊髓表面的功率为1mw,穿透率约为1%。温度测量示:100mw连续照射1020s时,脊髓组织温度不再变化,此过程中皮下组织温度升高未超过4℃、脊髓组织温度升高未超过2℃,以此为照射时间。(2)以筛选的照射参数对脊髓损伤大鼠进行弱激光照射治疗。在伤后7d、14d和21d时BBB评分及脊髓空洞面积比较显示:弱激光照射组的运动功能恢复显著优于对照组(P<0.05),脊髓空洞面积小于对照组(P<0.05)。对照组和照射组脊髓组织内IL-1β和IL-6的表达量在术后3h、6h、24h时无统计学差异,3d时IL-1β和IL-6的表达量开始出现统计学差异(P<0.05);第7d时,照射组IL-6表达低于对照组,有统计差异(P<0.05),而IL-1β表达两组间无统计学差异。结论:经过筛选:810nm、100mw、光斑面积0.2cm2、510J/cm(2500mw/cm2×1020s)的弱激光照射参数安全有效,可显著减小脊髓损伤区空洞面积的形成,并促进大鼠后肢运动功能的恢复。