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本论文将血红蛋白(Hb)的分析检测同电分析化学方法相结合,开展了Hb的电化学行为研究。为了满足纳米粒子标记物的需要开展了电化学生物探针用功能化纳米粒子的合成工作。主要内容以下:
1.开展了Hb的间接电化学分析的研究。Hb含有铁卟啉活性中心,具有类似过氧化物酶(POD)的催化活性,能够催化H2O2氧化氢供体。本文利用Hb这一催化活性,以滴汞电极为工作电极,邻联茴香胺(ODA)和邻联甲苯胺(OT)为氢供体底物,应用极谱分析法分别对Hb催化H2O2氧化ODA和OT的反应进行了研究。实验结果表明这两个体系催化反应的产物在汞电极上都有很好的极谱还原电流响应。基于反应产物的还原电流在一定条件下与Hb和H2O2的浓度都成正比,建立了一种用于检测Hb和微量H2O2的电化学分析的方法,并将该方法应用于新鲜雨水中H2O2含量的测定,得到了满意的结果。
2.开展了Hb在修饰电极上的直接电化学行为研究。以Nation/纳米碳酸钙/离子液体修饰碳糊电极为工作电极,考察了Hb在该修饰电极上的直接电化学行为。实验结果表明,Hb在Nafion/纳米碳酸钙膜内基本保持了其生物活性,并且在该修饰电极上其电子传递能力明显增强,有一对准可逆的氧化还原峰。对Hb的电化学行为进行了求解,其式电位不随扫速的变化而变化,电子转移数n为1.028,电子传递系数α为0.487,反应速率常数ks=0.128s-1。
3.开展了功能化半导体纳米粒子的合成工作。作为生物探针用纳米粒子标记物,纳米粒子的水溶性和生物相容性是制备过程中的关键步骤,所以合成生物相容性纳米粒子是目前研究工作的重点。采用装置简单、价格低廉的方法,以巯基乙酸为稳定剂和修饰剂,在水相中合成了表面修饰有巯基乙酸的CdS、ZnS和PbS纳米粒子,并利用电子显微镜、粒度分布仪、X-射线衍射和红外光谱等仪器分析的手段对其进行了表征。由于该纳米粒子的外面包覆了一层巯基乙酸,借助其外端的羧基,可以进一步与生物分子相结合,从而实现了其生物相容性的目的。