【摘 要】
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目的:观察PD1对LPS刺激人脐静脉内皮细胞(HUVECs)和中性粒细胞(PMNs)之间粘附性的影响及其机制。方法:选择复苏后的3～4代HUVECs进行转板,采用BCECF-AM荧光染料法测定PMNs-HUVE
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目的:观察PD1对LPS刺激人脐静脉内皮细胞(HUVECs)和中性粒细胞(PMNs)之间粘附性的影响及其机制。方法:选择复苏后的3～4代HUVECs进行转板,采用BCECF-AM荧光染料法测定PMNs-HUVECs细胞之间的粘附性。粘附性检测实验分为五组:对照组,LPS组,200nM PD1预处理PMNs组(P200组),20nM PD1预处理PMNs组(P20组),2nM PD1预处理PMNs组(P2组)。除对照组外,各组均用1ug/ml LPS作用6h后,P200组, P20组,P2组分别加入经200nMPD1,20nMPD1,2nMPD1预处理的BCECF-AM标记的PMNs,其余两组,加入未经PD1处理的BCECF-AM标记的PMNs,作用30min后,用荧光显微镜和荧光分光光度计对粘附在HUVECs上BCECF-AM标记的PMNs进行检测;并用流式细胞仪检测不同浓度(2nM、20nM、200nM)PD1对PMNs表面LFA-1的表达;Western检测不同浓度(2nM、20nM、200nM)PD1对HUVECs上ICAM-1的表达。结果:与LPS组相比,P2组,P20组,P200组均使PMNs和HUVECs之间粘附率降低(P<0.05),并呈浓度依赖性。不同浓度的PD1降低LFA-1(CD11a/CD18)的表达(P<0.05),而对ICAM-1的表达有降低趋势但是无统计学差异(P>0.05)。结论:PD1可降低PMNs和HUVECs之间粘附率,可能是与降低PMNs表面LFA-1(CD11a/CD18)表达有关。
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